HPLC法同时测定人血浆中苦参4种生物碱的含量
2014-12-03李志红解放军第324医院药剂科重庆400020
李志红(解放军第324医院药剂科,重庆 400020)
苦参,别名苦骨、地槐等,为豆科植物豆参Sophorae flavescensAit的干燥根[1]。生长于海拔1,500米的地区,多生在山坡、沙地、草坡、灌木林中和田野附近,目前尚未由人工引种栽培。其具有清热燥湿、杀虫、利尿之功效,中医临床常用于治疗热痢、便血、黄疸尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、湿疹等。现代药理研究表明,苦参具有调节血脂和抗脂质氧化[2-3],抗肿瘤[4],抗肝纤维化[5],抗炎[6],抗病毒[7],及免疫调节作用[8]。苦参中多种生物碱是其主要的药效学成分,其中以槐定碱、槐果碱、苦参碱、氧化苦参碱较为重要(见图1)。目前,对人血浆中苦参碱检测多集中于2种或单种成分[9-10],未见4种成分同时测定的报道。为此,笔者建立了在人血浆中同时测定槐定碱、槐果碱、苦参碱、氧化苦参碱的高效液相色谱(HPLC)测定法,以为苦参碱体内药动学的研究提供支持。

图1 4种生物碱化学结构式Fig 1 The chemic structureof 4 kinds of alkaloids
1 材料
1.1 仪器
1100型高效液相色谱仪,包括Agilent chemstation色谱工作站、1100DAD型检测器(美国Agilent公司);BSA223S型电子天平(德国赛多利斯公司);TG18G型高速离心机(湖南凯达科学仪器有限公司)。
1.2 试剂
槐定碱、槐果碱、苦参碱、氧化苦参碱对照品(中国食品药品检定研究院,批号分别为1105-200005、1201-2014、1085-9702、1127-7802);十二烷基硫酸钠、乙腈为色谱纯,水为三蒸水,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Agilent ZORBAX NH2(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(81∶10∶9,V/V/V);流速:1 ml/min;检测波长:210 nm;柱温:室温;进样量:20 μl。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 分别精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒质量的槐定碱、槐果碱、苦参碱、氧……
