贺 俐，吴杨

水稻土壤宏基因组中的β-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及酶活的研究

贺 俐，*吴杨

(井冈山大学生命科学学院，江西，吉安 343009)

β-葡萄糖苷酶(Ec3.2.1.21)属于糖苷水解酶家族3，它能够水解非还原性末端的β-D葡萄糖苷键，释放出游离的葡萄糖及相应的配基。β-葡萄糖苷酶是纤维素降解中的关键酶，对于可再生资源纤维素的利用具有十分重要的意义。本研究从水稻土壤中分离得到β-葡萄糖苷酶基因pds5，将其克隆到表达载体pET32a(+)中，转化BL21大肠杆菌中，并诱导表达该基因。重组BL21大肠杆菌用IPTG诱导后，所提取的酶蛋白具有β-葡萄糖苷酶的活性，经SDS-PAGE 分析，确定其相对分子质量为83 kD。通过控制pH和温度的方法，测得该酶酶活最适pH为7.0，最适温度为37.5℃。

β-葡萄糖苷酶；克隆；酶活

β-半乳糖苷酶(EC3.2.1.23)，又称乳糖酶，广泛存在于各种微生物、植物及动物组织中。该酶能够水解乳糖中的β-1,4-D-半乳糖苷键，使其降解成为半乳糖与葡萄糖，同时具有半乳糖苷的转移作用[1]。β-半乳糖苷酶可用于降解乳糖和生产低聚半乳糖，合成或修饰其它碳水化合物以及促进果蔬软化和成熟，同时在免疫、检测及疾病诊断方面也有应用。随着生物技术的发展，对编码此酶的基因结构有了相当了解，人们也获得了具有优良特性酶活性较高的β-半乳糖苷酶，使得β-半乳糖苷酶不仅在食品工业中的用途越来越广泛，而且在生物技术领域中也发挥着重要的作用，并被广泛应用于医药、化学等领域[2]。目前，工业用β-半乳糖苷酶主要来源于多种微生物如霉菌、细菌、放线菌及酵母菌[3]。……