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炭疽芽胞杆菌A16R株FtsE蛋白的可溶性表达和纯化

2014-10-27李强刘先凯冯尔玲朱力王沛王红杨新华赵美玲姜永强王恒樑

生物技术通讯 2014年1期

李强,刘先凯,冯尔玲,朱力,王沛,王红,杨新华,赵美玲,姜永强,王恒樑

1.白求恩医务士官学校,河北 石家庄 050081;2.军事医学科学院 a.生物工程研究所;b.微生物流行病研究所,北京 100071

炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)的芽胞侵入动物或人体可引起包括皮肤炭疽、胃肠道炭疽、肺炭疽在内的3种类型的炭疽疾病,并可被巨噬细胞吞噬而萌发,最终入血导致败血症,是一种非常重要的人畜共患病病原体[1]。炭疽杆菌的芽胞对繁殖体形式不易生存的环境,如干燥、高温、紫外线、电离辐射、极端pH值等的抵抗力极强,提高了菌体感染人或动物的几率;且炭疽杆菌的芽胞是其主要感染形式,并可制备为气溶胶而大面积扩散,成为生物战剂的首选。2001年10月发生的生物恐怖袭击中使用了炭疽芽胞,引起了全世界对于炭疽杆菌芽胞研究的关注[2]。

细菌芽胞形成是菌体分裂的一种特殊形式。我们前期的蛋白质组学研究发现FtsE蛋白在炭疽杆菌芽胞形成过程中明显上调,提示其可能在芽胞形成过程中发挥了重要作用[3]。Garti-Levi等在枯草芽胞杆菌芽胞形成研究中发现,FtsE蛋白不仅可作为ABC转运子摄取外界环境信号,激活Spo0A并起始芽胞形成过程,而且对芽胞形成过程中的不对称分裂起到了关键作用[4]。

为研究炭疽芽胞杆菌中FtsE蛋白的功能,我们利用基因工程技术将其编码序列克隆到原核表达载体,进行了可溶性诱导表达,并优化了亲和层析法大量纯化FtsE蛋白的条件,获得了高纯度目的蛋白,为下一步功能研究奠定了基础。……

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