离子色谱法测定生鲜乳中的硫氰酸根

2014-10-25穆阿丽初晓娜徐秀玲

中国饲料 2014年4期

穆阿丽，初晓娜，吴燕，徐秀玲，李辉，李彦

（青岛市饲料兽药检测站，山东青岛 266071）

硫氰酸钠是白色斜方晶，系结晶或粉末，易溶于水、乙醇和丙酮。原料乳或奶粉中掺入硫氰酸钠后可有效抑菌、保鲜。但硫氰酸钠是毒害品，少量的食入就会对人体造成极大伤害。2008年12月，卫生部发布的《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单（第一批）》中明确规定乳及乳制品中硫氰酸钠属于违法添加物质。硫氰酸根检测的常见方法有滴定法、光谱法、顶空或衍生气相色谱法和反相离子对色谱法等（黄丽等，2006；符展明等，1994）。本实验采用离子色谱法对生鲜乳中硫氰酸根进行测定。

1 材料和方法

1.1 仪器和试剂瑞士万通850型离子色谱仪（配电导检测器、858自动进样器）；固相萃取小柱：Supelclean LC-18 SPE Tubes；硫氰化钾标准品（纯度≥98.5%）。

1.2 标准溶液的配制准确称取于80℃烘箱内烘至2 h的硫氰化钾1.6986 g于1000 mL容量瓶中，定容，混匀，得1000 mg/L硫氰酸标准储备液。取硫氰酸标准储备溶液1 mL，置于100 mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液含硫氰酸10 mg/L。移取 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mL 硫氰酸标准中间液，用水定容于10 mL容量瓶中，浓度分别为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L，即为标准工作液，进行检测。

1.3 样品前处理准确量取液态奶样品4 mL，加入5 mL色谱纯乙腈，涡旋混匀，6000 r/min离心5 min，取上清液用超纯水稀释2倍，过5 mL甲醇和10 mL水活化的LC-18小柱除去样品中的脂肪，然后进行样品检测。

1.4 色谱条件色谱柱：Metrosep A Supp 5-250/4.0 mm；检测器：电导检测器；淋洗液：3.2 mmol/L Na2CO3+1.0 mmol/L NaHCO3+7.5%Acetone；流速：0.7 mL/min；柱温：30 ℃；进样体积：20 μL。

2 结果与讨论

2.1 色谱柱的选择硫氰酸根为疏水性的阴离子，具有易极化、保留性强的特点，在普通的离子色谱交换柱上易拖尾，峰形不对称。因此对硫氰酸根进行检测和分析，需要选择亲水性的色谱柱，这样才能改善色谱的峰形，提高检出灵敏度。 Metrosep A supp 5-150、A supp 5-250 为常见的阴离子交换柱。对这两种色谱柱分别进行实验比较（图 1、图 2），结果表明，使用 A supp 5-250柱能很好地将硫氰酸根与其他离子分开，并且能大大缩短保留时间，进而缩短样品分析时间。

图1 A supp 5-250测定硫氰酸根色谱图

图2 A supp 5-150测定硫氰酸根色谱图

2.2 淋洗液条件的优化应用离子色谱法测定硫氰酸根时，选用3.2 mmol/L Na2CO3+1.0 mmol/L NaHCO3的淋洗液浓度，能够很好提高离子的分离效果，并能缩短保留时间。为了减少吸附作用，改善峰形和缩短分析时间，常常需要在淋洗液中加入一定比例的丙酮。本实验分别添加15%、10%、7.5%三种不同比例的丙酮进行硫氰酸根的测定，结果表明，添加7.5%的丙酮完全可以达到实验需求，既能很好地改善硫氰酸根的峰形，同时又缩短了保留时间。

2.3 线性范围和检测限在选定的色谱条件下，对硫氰酸根的标准溶液进行检测，结果表明：浓度在0.1～5 mg/L，与峰面积有良好的线性关系，以硫氰酸根的质量浓度Q（mg/L）对相应的峰面积A作标准曲线，得到线性方程为A=-2.55107E-3+4.50037E-3×Q，线性相关系数为0.9993。以3倍的信噪比（S/N=3）计算得出方法的检出限为1.3 μg/L，以 10 倍的信噪比（S/N=10）计算得出定量限为 4.2 μg/L。

2.4 加标回收率和精密度分别添加硫氰酸根标准储备液 10、20、40、60、100 μL 于 4 mL 生鲜乳中，使之成为硫氰酸根含量分别为2.5、5、10、15、25 mg/L的阳性样品，在选定实验条件下进行加标回收实验，每个浓度平行测定6次，同时以牛奶做空白对照，检测结果见表1、表2。