刘文娟 宫玉典

卵巢癌是致死率最高的妇科恶性肿瘤之一，其致死率为癌症总致死率的5%，严重威胁女性健康[1]。目前，卵巢癌的主要治疗方法为化疗，使用的一线药物有紫杉醇，铂类等[2]。研究显示卵巢癌患者对紫杉醇及铂类药物治疗有较好的反应性，使用之初可明显抑制或缓解，但患者在持续治疗之后病情会恶化或复发，从而导致死亡。持续使用药物一段时间患者的病情加重与肿瘤细胞的耐药性相关，肿瘤细胞对这些化学治疗药物耐受，这些化学治疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用下降或消失，最终导致患者应药物耐受而死亡。顺铂是治疗卵巢癌的重要化疗药，本研究使用耐紫杉醇的卵巢癌细胞SKOV3-TR30为研究对象，观察顺铂对其生物学功能的影响，探讨SKOV3-TR30耐顺铂的主要机制，为SKOV3-TR30耐药性的逆转提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 材料 人卵巢上皮细胞癌细胞株SKVO3购自美国模式菌种收集中心（ATCC），使用中等剂量间隙结合低剂量维持的方法诱导建立SKOV3-TR30，使用含紫杉醇的McCOY’5A培养基对SKOV3-TR30进行培养传代，使用时将SKOV3-TR30用不含紫杉醇的McCOY’5A培养基培养3周。顺铂购自山东齐鲁制药有限公司，MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5二苯基四氮唑溴盐)，细胞周期试剂盒和凋亡试剂盒均购于森贝伽（南京）生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞周期检测将SKOV3及SKOV3-TR30细胞接种6孔板，保持每孔细胞数4×105/ml，37℃，5%CO2培养24h后换液，分别加入顺铂浓度为25.65、56.82μmol/L（此浓度为该细胞药物的半抑制浓度）的培养液培养48h，使用细胞周期试剂盒进行细胞周期检测。……