徐庆国，谈金强，张瑞菊，李坤

（1.山东省交通医院 心内科，山东 济南 250031；2.济南市济阳县人民医院 心内科，山东 济南 251400；3.山东省交通医院 皮肤科，山东 济南 250031；4.山东省医学科学院附属医院 妇产科，山东 济南 250031）

Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭患者细胞因子的影响

徐庆国1，谈金强2，张瑞菊3，李坤4

（1.山东省交通医院 心内科，山东 济南 250031；2.济南市济阳县人民医院 心内科，山东 济南 251400；3.山东省交通医院 皮肤科，山东 济南 250031；4.山东省医学科学院附属医院 妇产科，山东 济南 250031）

目的观察Rho激酶抑制剂、芪苈强心胶囊分别及联合短期应用对慢性心力衰竭患者细胞因子（肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6）水平的作用，并探讨其机制。方法120例慢性心力衰竭患者符合纽约心脏协会（New York Heart Association，NYHA）分级Ⅱ～Ⅲ级，在接受常规心衰治疗的基础上，随机分成4组，分别是空白对照组（A组，n＝30），单用Rho激酶抑制剂治疗组（B组，n＝30），单用芪苈强心胶囊治疗组（C组，n＝30）和Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊联合治疗组（D组，n＝30）均治疗4周。治疗前后测定肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、脑尿钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）评估心功能。结果治疗后B、C、D组分别与对照组A组相比TNF-α、IL-6、BNP水平均显著降低（P＜0.05），治疗组间（B组、C组、D组）治疗后，D组较B组、C组水平显著降低（P＜0.05）。结论Rho激酶抑制剂联合芪苈强心胶囊能显著降低慢性心力衰竭患者血清细胞因子TNF-α、IL-6水平，改善心功能，有利于慢性心力衰竭的治疗。

Rho激酶抑制剂；芪苈强心胶囊；细胞因子；慢性心力衰竭

1 材料与方法

1.1 一般资料 选择2010年1月～2013年1月期间在山东省交通医院收治的心衰患者（符合NYHA分级Ⅱ～Ⅲ级）120例，其中冠心病65例，扩张型心肌病17例，高血压病28例，风湿性心脏病10例。男性62例，年龄57～74岁，平均（64.5±5.6）岁，女性58例，年龄59～73岁，平均（66.2±5.5）岁。病程10个月～12年，平均（4.6±2.8）年。排除标准：6个月内的急性心肌梗死、感染、恶性肿瘤、脑卒中、未控制的高血压、糖尿病、肝肾功能不全、痛风、外科手术或严重创伤、免疫系统疾病、甲状腺功能异常、应用过甾体类抗炎药及血液系统疾病等。

1.2 仪器设备、药品及试剂 盐酸法舒地尔（天津红日药业，国药准字H20040356），芪苈强心胶囊（以岭药业，国药准字Z20040141），TNF试剂盒（上海拜力生物科技有限公司，）和IL-6试剂盒（上海越研生物科技有限公司），BNP试纸条（德国罗氏公司），Cardiac Reader心肌标志物定量检测分析仪（德国罗氏公司）。

1.3 方法

1.3.1 分组：所有入选患者均于入院次日检测TNF-α、IL-6、BNP水平，并随机分为4组，分别是空白对照组（A组，n＝30），单用Rho激酶抑制剂治疗组（B组，n＝30），单用芪苈强心胶囊治疗组（C组，n＝30）和Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊联合治疗组（D组，n＝30）。4组研究对象年龄、性别、吸烟史、高血压、糖尿病、血脂水平、基础用药情况及治疗前TNF-α、IL-6、BNP水平的差异无显著性。4组均应用剂量相似的ACEⅠ或ARB类、利尿剂、地高辛和β受体阻滞剂等治疗，B组加用Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔60mg静点2次／d，C组加用芪苈强心胶囊4粒口服3次／d，D组加用Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔60 mg静点2次／d同时芪苈强心胶囊4粒口服3次／d。所有患者均连续应用4周，均常规检测血常规、凝血功能、肝肾功能等。研究经我院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

1.3.2 TNF-α、IL-6测定：采用 ELISA法测定 TNF-α和IL-6。所有受检者空腹12 h以上，清晨7∶00-8∶00采血，采血时平卧位，休息15min以上，采集肘正中静脉血4～6mL，室温下自然凝固，1 500 r／min离心10min后，分离血清，置于－80℃超低温冰箱保存待标本收集完全后同批测定。肝肾功能采用普通干管，采静脉血4mL，分离血清后当日在生化室检测。

1.3.3 BNP测定：BNP标本采集：4组受试者均在治疗前及治疗结束后于清晨空腹采肘静脉血2 m L置于肝素锂抗凝管中混匀，不需离心，采用酶联免疫吸附法测定血浆BNP水平。

1.4 统计学方法 所有数据输入SPSS13.0统计软件包进行统计，正态计量资料用“±s”表示，组间比较采用t检验，组内治疗前后比较用配对t检验。计数资料用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 4组患者一般资料比较 4组患者的年龄组成、性别比例、病史等一般临床资料无显著性差异（见表1）。

表1 4组患者一般资料Tab.1 Comparison of general information in four groups

2.2 治疗组治疗后与对照组比较，TNF-α、IL-6、BNP水平显著降低（P＜0.05），治疗组间（B、C、D组间）治疗后，D组较 B组、C组水平显著降低（P＜0.05）。

表 2 4组患者治疗前后 TNF-α、IL-6、BNP水平比较（ng／L）Tab.2 Comparison of TNF-α，IL-6，BNP levels in four groups before and after treatment（ng／L）

3 讨论

CHF因其高发病率、高死亡率目前仍是心血管领域尚未攻破的堡垒之一。研究表明，原发性心肌损伤与负荷过重，通过神经内分泌系统的激活以及多种炎症细胞因子的参与，使得心肌组织中多条信号调节途径激活，进而表现为心脏代偿性肥厚、心肌细胞重构，这一导致心衰的关键环节的病理生理机制则包括心肌细胞内钙离子浓度的增高和TNF-α、IL-6在内的多种炎症因子的生成，这些都有Rho激酶通路的参与［3］。针对Rho／ROCK信号通路抑制剂的药物研发策略，主要集中在防治高血压、动脉粥样硬化、心肌梗死和心力衰竭等心脑血管疾病。TNF-α、IL-6是由激活的单核巨噬细胞分泌的可以诱导凋亡的炎症细胞因子，具有多种负面生物学效应，2者通过负性肌力作用、诱导心室重构、诱发心肌细胞凋亡，加快心衰进程［4］。致炎细胞因子TNF-α、IL-6可作为心力衰竭病理生理状态和预后评价的标记物。本实验结果表明Rho激酶抑制剂可以拮抗CHF患者的炎症反应，降低TNF-α、IL-6炎症因子的水平。

Rho激酶是具有信息传导和分子开关功能的信号多肽［5］，参与动脉粥样硬化、血管再狭窄及血管痉挛的发病机制［6］。Breslin［7］等报道，Rho激酶抑制剂可抑制C5a活化的中性粒细胞所诱导的冠状静脉内皮细胞肌动蛋白重构及内皮屏障功能的紊乱，降低内皮的通透性。故 Rho激酶抑制剂通过抑制炎细胞的浸润，减少炎症介质的产生，可拮抗炎症反应，从而改善CHF患者心功能。长期给予Rho激酶抑制剂法舒地尔（8周），能够逆转实验猪的粥样硬化冠脉痉挛、损伤、压力重构等血管性疾病的发展，对抗心肌缺血。中医理论认为心衰为气血两虚、血瘀气滞、阳虚水泛所致，认为心气虚乏、运血无力是心衰发病的中医病机根本。芪苈强心胶囊正是基于此病机的有效治疗CHF的中成药制剂，其按照君臣佐使配伍，由黄芪、人参、附子、丹参、葶苈子、泽泻、玉竹、桂枝、红花、香加皮、陈皮等组成。其中40余种单体化合物可能通过协同或互补作用治疗心衰［8］。方中黄芪、附子为君，益气温阳而促进心功能，具有强心作用［9］。人参、丹参、葶苈子为臣，三药合用，共达补气、活血、利水、通络之功效。人参可改善心室重构［10］；丹参可增加心肌ATP含量［11］；葶苈子强心利尿［12］；佐药红花、香加皮、泽泻、陈皮、玉竹活血通络、利水消肿；桂枝引药入洛。诸药合用以奏效机［13］。充分发挥其复方多环节、多途径、多靶点的治疗优势。本实验研究结果表明单用Rho激酶抑制剂或单用芪苈强心胶囊较治疗前显著降低TNF-α、IL-6、BNP水平，与对照组比较亦效果显著，但2者比较治疗效果相当，无明显统计学差异，2者联合则更进一步明显改善炎症因子及心功能指标。故本实验结果表明在常规心衰治疗的基础上，Rho激酶抑制剂联合芪苈强心胶囊可以进一步拮抗慢性心衰患者的炎症反应，进而改善患者心功能，值得临床推广应用，但2者联合的相互作用机制有待进一步研究。

［1］ Nian M，Lee P，Khaoer N，et al.Inflammatory cytokines and postmyocardial infarction remodeling［J］.Circ Res，2004，94（12）：1543.

［2］ Gullestad L，Ueland T，Vinge LE，et al.Inflammatory cytokines in heart failure：mediators and markers［J］.Cardiology，2012，122（1）：23-35.

［3］ 张新军，章茂顺.心肌炎症反应与心室重构［J］，华西医学，2005，20（4）：788-789.

［4］ 刘新灿，张正勋，陈晓玲，等.芪苈强心胶囊对心力衰竭患者心功能、脑钠素及炎性因子水平的影响［J］中西医结合心脑血管病杂志，2011，9（8）：905.

［5］ Leung T，Manser E，Tan L，et al.A novel serine／threonine kinase binding the Ras-related RhoA GTPase which translocates the kinase to peripheral membranes［J］.J Biol Chem，1995，270（49）：29051-29054.

［6］ Somlyo AP，Somlyo AV.Signal transduetion by G-proteins，rho-kinase and protein phosphatase to smooth muscle and non-muscle myoein II［J］.J Physiol，2000，522：177-85.

［7］ Breslin JW，Yyan SY.Involvement of RhoA and Rho kinase in neutrophil stimulated endothelial hyperpermeability［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2004，286（3）：1057-62.

［8］ Kang LP，Zhao Y，Yu HS，et al.Identification of chenmical constituents in qiliqiangxin capsule by UPLC-Q-TOF／MS（E）［J］.Acta pharmaceutica Sinica，2011，46（10）：1231-1236.

［9］ 牛琳琳，琚保军.附子在心血管疾病中的应用及配伍研究［J］.中医临床研究，2012，9（4）：27-28.

［10］ 付双全.人参的心血管作用药理学研究进展［J］，长春中医药大学学报，2012，28（2）：357-358.

［11］ 赵仁霞.丹参的现代药理研究及临床应用［J］.中国医药指南，2011，9（12）：291-292.

［12］ 王妍，贡济宇.葶苈子的化学成分及药理作用研究［J］.长春中医药大学学报，2008，24（1）：39-40.

［13］ 李彦霞，贾振华，张鑫月.芪苈强心胶囊对慢性舒张性心力衰竭患者心脏舒张功能的影响［J］.疑难病杂志，2013，12（4）：261-263.

（编校：谭玲）

Effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsules on serum cytokines in patients w ith chronic heart failure

XU Qing-guo1，TAN Jin-qiang2，ZHANG Rui-ju3，LIKun4，LIU Yan-mei5

（1.Department of Cardiology，Traffic Hospital of Shandong Province，Ji'nan 250031，China；2.Department of Cardiology，People's Hospital of Jiyang，Ji'nan 251400，China；3.Department of Dermatology，Traffic Hospital of Shandong Province，Ji'nan 250031，China；4.Department of Obstetrics and Gynecology，Affiliated Hospital of Shandong Academy of Medical Science，Ji'nan 250031，China）

ObjectiveTo observe the short term effects of Rho-kinase inhibitor and Qiliqiangxin capsule on serum tumor necrosis factor-α（TNF-α）and interleukin-6（IL-6）levels in patientswith chronic heart failure，and explore themechanism.Methods120 chronic heart failure patients received conventional treatment for 4 weekswere divided into blank control group（Group A，n＝30），Rho-kinase inhibitor treated group（Group B，n＝30），Qiliqiangxin capsules-treated group（Group C，n＝30），and the other 30 cases were treated with Rho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsules（GroupD，n＝30）.TNF-α，IL-6 and BNPweremeasured and cardiac function was evaluated before and after treatment.The difference between 4 groupswas analyzed.ResultsAfter treatment，the levels of TNF-α，IL-6，BNP in the observation group were lower than that in the control group.The difference was statistically significant（P＜0.05）.The levels of TNF-α，IL-6，BNP in the D group were lower than that in the B and C group.The difference was statistically significant（P＜0.05）.ConclusionRho-kinase inhibitor combined with Qiliqiangxin capsule can improve cardiac function and reduce levels of serum cytokines associated with chronic heart failure，which is conducive to the treatment of chronic heart failure.

Rho-kinase inhibitor；Qiliqiangxin capsules；cytokines；chronic heart failure

R541.4

A

1005－1678（2014）04－0076－03

慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是心血管疾病的最终结果，其发生发展是一复杂而长期的过程，包括炎性细胞因子在内的多种因素的影响，细胞因子参与多种免疫反应，细胞因子在体内的高度表达与心功能恶化相关［1］。故有效降低心衰患者血清细胞因子水平，为临床治疗心衰提供了新思路［2］。已有研究表明，心力衰竭时心肌组织中Rho激酶mRNA水平呈明显高表达，故Rho激酶抑制剂能有效抑制心衰进展。芪苈强心胶囊作为中成药制剂对心衰有明确治疗作用。本研究旨在观察Rho激酶抑制剂法舒地尔及芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭患者细胞因子（TNF-α、IL-6）水平及心功能的影响，并探讨其可能的机制。

山东省自然科学基金 （ZR2009CL027）；济南市科技局科技明星计划（20100118）；山东省医学科学院基金（201023）

徐庆国，男，本科，研究方向：冠心病介入，E-mail：xqg6635＠163.com。