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RNAKL及其相关因子在中耳胆脂瘤患者瘤组织中的分布和表达水平

2014-09-13蒋正举王正龙

中国老年学杂志 2014年18期

杨 琴 万 明 蒋正举 王正龙 赵 晓

(遵义医学院附属医院耳鼻喉科,贵州 遵义 563003)

临床常根据胆脂瘤发病位置分为颅内胆脂瘤、胆脂瘤型中耳炎及外耳道胆脂瘤等几类,系异位胚胎残余的外胚层组织的良性肿瘤〔1〕。虽然胆脂瘤是良性病变,但其具有恶性肿瘤生物行为,对中耳、颞骨等存在广泛损伤,而破骨细胞分化因子(RANKL)、配体核因子-κB受体活化因子(RANK)和骨保护素(OPG)在这一过程中扮演着重要角色〔2〕。本文旨在探究胆脂瘤骨质破坏与RANKL、RANK和OPG之间的联系。

1 资料与方法

1.1一般资料 我院耳鼻喉科2010年4月至2013年8月中耳胆脂瘤患者28例。男13例,女15例、年龄60~67岁,平均年龄(60.5±5.6)岁;病程3个月~2年,平均(11.2±5.4)个月。纳入标准:①胆脂瘤患者均经过术前高分辨率CT检查及术后病理学确诊;②均为第一次接受治疗。排除标准:胆脂瘤伴有耳道其他病变、手术前接受过相关药物治疗的患者。正常组20例,男8例,女12例;年龄61~68岁,平均年龄(61.7±5.8)岁;两组年龄、性别差异不具有统计学意义(P>0.05)。

1.2免疫组织化学检测方法 武汉博士德生物工程有限公司生产的兔抗人RANKL和OPG多克隆抗体;北京中杉生物技术有限公司生产的DAB显色试剂盒及免疫组织化学SP试剂盒。将新鲜标本快速置于中性甲醛溶液内充分固定,常规包埋,并行连续切片操作。染色操作按试剂说明书进行:标本脱蜡水化后,选用过氧化氢甲醛阻断内源性过氧化物酶活性,再行PBS修复抗原,并应用非免疫性山羊血清封闭,加入OPG多克隆兔IgG抗体一抗,于4℃温箱内过夜,加入生物素标记二抗,常温内孵化25 min,苏木精染色,树胶封片,于显微镜下检测RANKL、RANK、OPG、肿瘤坏死因子受体(TNFR)1表达情况。

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