倪程耀 陈 新 吴胜军

(浙江大学医学院附属第一医院心胸外科，浙江 杭州 310053)

肺缺血再灌注(I/R)损伤(LIRI)常发生在体外循环手术、肺移植、肺栓塞治疗恢复血液供应后，再灌注引起的组织及器官的损伤〔1〕，临床症状多表现为不减轻反而加重。LIRI是个复杂的病理过程，其机制至今不明，研究〔2〕发现其与氧自由基、炎性因素、肺部组织细胞损伤有密切相关。LIRI后，出现炎性细胞聚集，细胞因子大量表达，并且免疫因子基因敲除鼠的梗死面积明显减少，进一步提示免疫因素在LIRI中存在重要作用。本研究观察LIRI模型鼠中白细胞及相关细胞因子的变化，来探讨免疫因素在LIRI中的作用。

1 对象与方法

1.1实验动物及分组 选取90只健康雄性Wistar大鼠，体重200～300 g，随机分为3组，每组30只。I/R组，行左肺I/R；Sham组(假手术组)，只开胸而不行左肺I/R；C组，对照组，不采取任何干预措施，只放血处死大鼠。

1.2动物模型建立 经耳缘静脉注射30 mg/kg的苯巴比妥钠麻醉，气管切开后插管，接动物呼吸机控制呼吸，呼吸频率60次/min，潮气量单侧肺通气8～10 ml/kg，双侧肺通气15～20 ml/kg，呼吸比1∶2。然后经胸骨右缘第3～5肋间开胸，离断周围组织，游离左肺门，呼气末时结扎右肺门，60 min后开放行再灌注120 min，制成体外肺I/R模型。

1.3标本采集及检测方法 各组于缺血30 min、再灌注60、120 min时采集标本。采集支气管肺泡灌洗液(BALF)，采用考马斯亮蓝染色法对其总蛋白(TP)的测定，收集支气管肺泡灌洗液沉渣，白细胞计数(WBC)，并采用瑞氏染色进行白细胞分类，计算中性粒细胞(PMN)的百分比；取一定的肺组织，应用天平称量其湿质量(W)，置于70℃烤箱烘烤48 h后，测量其干质量(D)，W与D比值即为肺组织的湿/干重比(W/D)；……