越桔原花青素对SHG-44脑胶质瘤细胞生长的作用
2014-09-13杨宁江杨淑艳赵东海刘晓阳
钟 越 齐 玲 杨宁江 任 旷 杨淑艳 赵东海 刘晓阳
(吉林医药学院科研学术处,吉林 吉林 132013)
越桔又称蓝莓,我国野生的笃斯越桔主要分布在吉林省长白山地区,因其富含原花青素(PC)而受到广泛关注。大量的研究表明,PC具有抗肿瘤、抗衰老及增强免疫功能等多种药理作用〔1~3〕。但关于越桔PC抗肿瘤的研究比较少,尤其是对脑胶质瘤细胞的作用尚未见相关报道。本实验研究越桔PC对胶质瘤细胞株SHG-44细胞生长的作用。
1 材料与方法
1.1细胞和主要试剂 人脑SHG-44细胞株由吉林大学基础医学院提供。越桔PC购于南京苏朗医药科技开发有限公司;RPMI-1640培养液购自Hyclone公司;0.25%胰酶和小牛血清购自美国Gibco公司;二甲基亚枫(DMSO)和噻唑蓝(MTT)均购自美国Sigma公司。
1.2SHG-44细胞的培养 自液氮罐中取出冻存的人脑SHG-44细胞,将其置于37℃水浴振荡融解,再用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液混匀后置于25 cm2培养瓶中,在37℃、5%CO2及饱和湿度条件下进行培养,隔日换液一次。
1.3MTT检测SHG-44细胞的生长情况 将对数生长期的SHG-44细胞制成单细胞悬液,以8 000个/孔密度接种于96孔板中,置于37℃、5% CO2及饱和湿度条件下培养过夜。次日加入越桔PC(5、10、20、40 μg/L,含5%小牛血清的RPMI-1640培养液为基础培养液),每个浓度设5个复孔,分别作用24、48、72 h时,并设空白对照组。终止反应时,各孔再加入MTT 20 μl,继续孵育4 h,弃上清,每孔加入DMSO 150 μl,振荡后在全自动酶标仪上测定各孔490 nm 区的吸光度值。

2 结 果
5、10、20、40 μg/L越桔PC作用SHG-44细胞24、48、72 h时,均可明显抑制胶质瘤细胞的生长。10、20、40 μg/L各浓度越桔PC组在作用24、48、72 h时,细胞的生长均受到明显的抑制,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);5 μg/L浓度越桔PC组在作用72 h时,胶质瘤细胞的生长亦明显受到抑制,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
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