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利用高效液相色谱法同时测定土曲霉发酵液中衣康酸及残糖

2014-09-08黄筱萍熊大维黄国昌

江西科学 2014年6期

刘 兰,黄筱萍,熊大维,黄国昌,张 婷

(江西省科学院微生物研究所,330096,南昌)

利用高效液相色谱法同时测定土曲霉发酵液中衣康酸及残糖

刘 兰,黄筱萍,熊大维,黄国昌,张 婷

(江西省科学院微生物研究所,330096,南昌)

建立了高效液相色谱(HPLC)快速测定土曲霉发酵液中衣康酸及残糖的分析方法。使用TOSOH Tskgel oApak-A色谱柱,以0.75 mmol/L H2SO4为流动相,在柱温45 ℃,流速1.0 mL/min的条件下,采用示差折光检测器进行检测。结果表明,该方法在20 min内可实现发酵液中衣康酸和葡萄糖的完全分离与定量。衣康酸在0~10.056 g/L范围内的线性关系良好,相关系数为0.999 9,相对标准偏差(n=6)为0.33%,加标回收率100.88%~102.74%。葡萄糖在0~6.016 g/L范围内的线性关系良好,相关系数为0.999 9,相对标准偏差(n=6)为0.12%,加标回收率101.26%~103.12%。该法适用于土黄霉发酵液中衣康酸和葡萄糖的快速、高效分离和定量测定。

高效液相色谱;衣康酸;葡萄糖;土曲霉;发酵液

0 引言

衣康酸(Itaconic acid)学名亚甲基丁二酸、甲叉丁二酸、亚甲基琥珀酸[1],是世界上5大有机酸之一。由于其含不饱和双键,具有活泼的化学性质,能进行各种加成反应,酯化反应和聚合反应,是化学合成和化工生产的重要工业原料,在化纤、合成树脂、塑料、橡胶、医药、表面活性剂以及食品领域具有广泛的应用,随着衣康酸具有的独特性能被认识及应用范围的迅速扩大,衣康酸的生产技术也在不断进步[2]。

发酵法生产衣康酸由于原料易得,工艺技术成熟,是目前国内外工业生产一致采用的方法[4]。测定衣康酸发酵液中残糖及衣康酸的变化,对揭示代谢途径以及控制发酵过程,从而优化发酵工艺条件意义重大。……

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