康亚国，张 欣，许苗苗，王 薇，宋小妹(陕西中医学院，咸阳 712046)

糖尿病由于胰岛素分泌不足或胰岛素作用缺陷而导致高血糖及尿糖，其伴随着碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢紊乱，可引起微血管和周围神经等诸多病变，导致神经、心血管、肾脏和眼等多器官慢性损伤和功能衰竭。其中糖尿病慢性脑病[1]由于严重损伤中枢神经功能而发生的糖尿病性认知功能障碍，是严重的临床综合征，主要表现为学习记忆功能减退、思维迟钝等，最终导致痴呆的发生。糖智宁胶囊为中药复方制剂，系由葛根、珠子参、黄连等中药组成。君药葛根生津止渴、清热，既可通过对抗肾上腺素的升血糖作用来降糖，又可改善心脑血管血流量而降低血压[2-3]，其主要的有效成分是黄酮类物质。而珠子参中皂苷成分则是通过刺激胰岛释放胰岛素而发挥降糖作用[4]。佐药黄连则是由有效成分小檗碱通过糖原异生和促进糖酵解产生降糖作用[5]。本研究旨在观察糖智宁胶囊对链脲佐菌素糖尿病模型[6-7]大鼠降血糖及认知功能的作用，为中药新产品的开发奠定基础。

1 仪器与材料

1.1仪器 赛多利斯电子天平(德国赛多利斯，GB204)；恒温水浴锅(立常州实验设备研究所，HH-S114)；Morris水迷宫设备(北京中科院生理所)。

1.2试药 糖智宁胶囊(批号20120418，20120620，20121010)；链脲佐菌素(科昊生物工程有限责任公司，批号000067)；盐酸二甲双胍(贵州圣济堂制药有限公司，批号H52020955)；血糖试纸(长沙三诺生物传感技术股份有限公司，批号2206NM)。

1.3实验动物 SD雄性大鼠，体质量220～250 g，由第四军医大学实验动物中心提供。合格证号：陕动字10-13。大鼠饲料、垫料均由第四军医大学实验动物中心提供。

2 方法

2.1糖智宁胶囊对链脲佐菌素致糖尿病大鼠空腹血糖的影响

2.1.1药物的配制 糖智宁胶囊：取糖智宁胶囊内容物适量，用蒸馏水配制成混悬液，分别稀释成质量浓度为4.58，9.16和13.74 mg·mL-1的药液，4 ℃冰箱保存，供灌胃给药用。

链脲佐菌素溶液的配制：0.1 mol·L-1pH 4.5柠檬酸缓冲液(使用前配用)。甲液：4.2 g柠檬酸溶于200 mL水中；乙液：5.8 g柠檬酸钠溶于200 mL水中；甲︰乙(57︰43)混合高温高压(121 ℃)灭菌15 min，4 ℃冷藏备用。

2.1.2糖尿病大鼠模型复制及血糖检测 SD大鼠适应性喂养1周后，禁食不禁水12 h，链脲佐菌素用柠檬酸缓冲液配成6 mg·mL-1的溶液，按60 mg·kg-1体质量一次性腹腔注射，STZ注射1周，剪尾采血测动物空腹血糖(FBG)，若FBG≥11.1 mmol·L-1即造模成功，用血糖试剂盒测定血糖，空腹血糖值在11.1 mmol·L-1以上者确定为造模成功，并以所测定血糖为基础血糖。将空腹血糖值在11.1 mmol·L-1以上的大鼠按血糖值随机分为6组：空白对照组(蒸馏水20.0 mL·kg-1)、模型对照组(蒸馏水20.0 mL·kg-1)、二甲双胍对照组(93.75 mg·kg-1)、糖智宁胶囊小剂量组(0.47 g·kg-1)、糖智宁胶囊中剂量组(0.94 g·kg-1)、糖智宁胶囊大剂量组(1.40 g·kg-1)，每组9只，每日灌胃给药1次，给药容量均为20 mL·kg-1；给药周期为20 d。各组大鼠给药20 d后，禁食12 h、不禁水，剪尾取血后用血糖试纸测定，记录各给药组和对照组动物空腹血糖值，检测数据进行统计学处理。

2.2Morris水迷宫方法行为测试 所有实验动物均于药物干预后接受Morris水迷宫行为测试。设定120 s为最长逃避潜伏期，超过120 s的记录为120 s。若大鼠在120 s内仍未能找到平台，则由实验者将其引向平台，并在平台上休息15 s，每次测试间隔为15 s。测试结果以大鼠寻找平台的逃避潜伏期、运动路程及穿越过平台目标次数表示。

3 实验结果

3.1糖智宁对糖尿病大鼠血糖的影响 由实验结果可知：给药前，与空白对照组比较，模型对照组、二甲双胍对照组、糖智宁胶囊大、中、小剂量组空腹血糖值均有明显提高，差异有统计学意义(P<0.01)，表明糖尿病模型成功；与模型对照组比较，二甲双胍对照组、糖智宁胶囊大、中、小剂量组用药前空腹血糖值比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。给药后，二甲双胍对照组、糖智宁小、中、大剂量组的空腹血糖值与用药前空腹血糖值相比，有明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。实验结果说明糖智宁胶囊有较强的降低链脲佐菌素致糖尿病大鼠空腹血糖的作用。结果见表1。

表1 TZN胶囊对链脲佐菌素糖尿病大鼠空腹血糖的影响

3.2糖智宁对糖尿病致大鼠学习记忆障碍的影响 Morris水迷宫实验结果显示，经过4 d的水迷宫训练实验，模型组大鼠搜寻隐藏平台的逃避潜伏期和游泳路径较正常组明显延长(P<0.01)，表明模型组大鼠存在明显的学习记忆获得能力障碍，而糖智宁治疗组则表现为对其学习记忆障碍的治疗作用：糖智宁胶囊大剂量组的逃避潜伏期及游泳路径较模型组明显减少(P<0.01)；糖智宁胶囊中剂量组与模型组比较有较好的改善(P<0.05)；糖智宁小剂量组与模型组比较，差异无统计学意义；结果见表2和表3。

表2 大鼠在Morris水迷宫潜伏期的变化

4 讨论

糖尿病患者受到剧烈运动、疼痛、寒冷、疲劳等各种应激时，体内对抗胰岛素的各种激素，如生长激素、肾上腺素、肾上腺皮质激素及胰高血糖素分泌增多，加速糖原分解，均会引起血糖的升高，因此血糖的高低可作为糖尿病缓解的基本指标。而糖尿病最大的危害是并发症的产生和发展，行为学变化是脑老化的重要指标之一， 学习记忆减退和行为操作能力下降是神经系统衰老的主要表现[8-9]。水迷宫实验[10]是测试学习记忆能力及空间认知能力的主要指标。

表3 大鼠在Morris水迷宫训练游泳距离的变化

血糖测试结果显示：模型组糖尿病大鼠的血糖与正常对照组比明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)，糖智宁胶囊大、中、小剂量组大鼠血糖在给药后，血糖明显降低，较模型组差异有统计学意义(P<0.05)，提示糖智宁胶囊对糖尿病大鼠有一定的降低血糖作用。

Morris水迷宫实验显示，模型组糖尿病大鼠表现为学习记忆功能的障碍，糖智宁治疗组大、中剂量组大鼠的逃避潜伏期及游泳路程明显比模型组减少(P<0.01)，提示糖智宁胶囊可能对糖尿病大鼠记忆障碍有一定的防治作用。

结合血糖和水迷宫实验结果可知，糖智宁胶囊中剂量(0.94 g·kg-1)可明显降低糖尿病大鼠血糖及改善记忆障碍，可作为最优剂量。为糖智宁治疗糖尿病患者学习记忆障碍提供了可靠依据，其作用机制还有待于进一步实验研究。

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