戴秀美 王清明 惠涌泉 王秋菊 常维山*

（①山东农业大学动物科技学院 山东 泰安 271018 ②山东菁华农牧发展有限公司 山东 诸城③ 山东诸城市皮毛动物研究所）

犬瘟热是犬类、毛皮动物和部分海洋哺乳动物的一种多发性、高度接触性烈性传染病[1]，病死率差异很大，为30%～80%。早期以双相热、结膜炎、支气管炎、卡他性肺炎、胃肠炎为特征，后期出现明显的神经症状，部分病例足垫过度角质化。自1973年我国首次发现犬瘟热以来，该病已给毛皮动物养殖业带来了巨大的经济损失，是毛皮动物养殖三大疫病之一。虽然犬瘟热疫苗在中国毛皮动物养殖业中得到了推广应用，但犬瘟热引起貂、狐和貉等毛皮动物死亡率仍然较高(平均23.2%)[2]。虽然有犬瘟热疫苗出售，但仍存在免疫失败现象。为了解使用激素后水貂犬瘟热免疫效果，2013年9～10月笔者对大连市、诸城市部分水貂养殖场进行了CDV血清学调查与分析。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 样品采集 2013年9～10月水貂出栏期间对诸城市和大连市部分水貂养殖场进行随机心脏采血取样，共100份血清。其中诸城市50份，大连市50份。水貂养殖场均使用齐鲁动物保健厂CDV-11株犬瘟热活疫苗进行犬瘟热的免疫。

1.1.2 主要试剂及仪器 CDV-Ab ELISA 48孔和96孔检测试剂盒(美国RB公司生产)、酶标仪、50ml移液枪、50ml排枪、300ml排枪、37℃温箱、湿盒、黄白枪头等。

1.2 方法

1.2.1 采血和血清分离 随机采集的100份血样，心脏采血后将离心管静置放置20min，后3000r/min离心3～5min，收集血清置于-20℃备用。

1.2.2 酶联免疫吸附试验(ELISA) 按照美国RB公司CDV-Ab ELISA 检测试剂盒使用说明步骤进行，以96孔板为例，每板设置阴阳性对照8孔，并加入阴阳性各50ml；……