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核糖体蛋白L22对果蝇发育的影响及机制

2014-08-15李红艳

河北大学学报(自然科学版) 2014年1期

李红艳

(西藏民族学院 医学院,陕西 咸阳 712082)

核糖体蛋白在核糖体组装和蛋白质合成中有重要作用.人类中一些核糖体蛋白的异常表达常引起一些疾病的发生,如Diamond-Blackfan贫血症[1]、特纳综合征[2]、听力丧失[3]和癌症[4].研究发现,果蝇中一些核糖体蛋白的突变可引起幼虫发育迟缓,刚毛短小、稀疏,生殖力和生活力低下,并隐性致死等特征,这些表型被称为Minute表型.目前对其解释为:某一核糖体蛋白基因突变后,引起细胞生长和增殖率减少[5-6];编码核糖体蛋白的基因发生突变,导致核糖体合成受损,引起蛋白合成速率减少[7].另外,一些核糖体蛋白在细胞周期、凋亡、DNA损伤修复等过程中也有着重要作用,但这些作用和该核糖体蛋白在核糖体组装和蛋白质合成中的作用无关.

L22是核糖体60 S大亚基的组成成分,除了自身参与核糖体组装和蛋白质合成外,并与其他多亚基核糖核蛋白颗粒一起发挥相应的生物学功能[8].另外,L22通过与病毒调节蛋白如ICP-4和ICP-22相互作用[9],调节病毒早期基因EAP的转录[10].L22诱导p53表达,选择性阻止αβT细胞发育[11].果蝇Kc细胞删除L22后,通过与组蛋白H1相互作用抑制基因的转录[12].但有关L22在果蝇发育中的作用及机制还不清楚.本研究证实,L22对于果蝇正常发育是不可缺少的,且主要是通过细胞凋亡和细胞周期阻滞的方式发挥作用的.

1 材料和方法

1.1 L22 RNAi转基因果蝇的获取和饲养

以果蝇L22 cDNA编码区为模板,进行PCR扩增(上游引物5-caagcggccgcggtgaacaacctgggcaa-3;下游引物5-ccggaattcgcatcgtcgtcctcatcgtc-3).将扩增产物通过Not I和EcoR酶切位点克隆到SympUAST-w载……

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