探析黄芪多糖对脂多糖诱导大鼠心肌细胞肥大的影响
2014-08-15汪海宁
汪海宁
近些年来,我国心肌细胞肥大的人数正呈现急速上升的趋势,由于存在诸多未解问题,引来社会一片热议。目前,临床医学中,尚无黄芪多糖在体外培养心肌细胞肥大的药理方面的报道,王新平、张朝云等人从实验角度方面探讨这方面的问题。对此,本文借助自己的临床实践,探析黄芪多糖对脂多糖诱导大鼠心肌细胞肥大的影响。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取新生的SD大鼠出生日为1~3 d,雌雄不限,将其作为研究对象,将其细胞按照规定培养2 d之后,同时设定对照组、模型组,按照黄芪多糖的浓度设定为低、中、高质量组。
1.2 方法 药品与试剂:黄芪多糖(天津赛诺制药有限公司,国药准字Z 20040086),质量分数为98%。脂多糖(LPS)为Sigm a公司生产;DMEM培养基选用Gibco公司的产品;胎牛血清选取杭州四季青生物工程材料有限公司的产品;Fluo-3/Am选取江苏碧云天生物工程公司的产品;大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA检测试剂盒为研域化学试剂有限公司的产品;RT-PCR试剂盒,选用的为大连宝生物工程有限公司的产品[1]。对体外乳鼠心肌细胞原代培养,在对细胞进行常规性地培养2 d之后,对其分为对照组、黄芪多糖低、中、高质量浓度组。选用的对照组不实施任何处理措施,
黄芪多糖低、中、高质量浓度组则分别选用黄芪多糖1、10、100mg/L的孵育乳鼠心肌细胞,而后依据规定的步骤加进LPS 1mg/L。
应用计算机的图像分析系统测量这些细胞的体积,采用RT-PCR法认真地检测大白鼠心房利钠多肽(ANP)m RNA表达[2],应用ELISA法检测这些细胞中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,应用Fluo-3/Am荧光染色剂来承载这些细胞,进而在激光共聚焦的显微镜下检测细胞内的钙离子浓度([Ca2+]i)的短时间的变化[3]。……
