冯 颖，王芊芊，陆文昊，曹敏梁

(1. 浙江大学实验动物中心， 杭州，浙江 310058；2. 台州医院生殖中心，台州，浙江 317000)

C57BL/6J近交系小鼠以其特有的生理学特性，被广泛用于制作转基因小鼠。在转基因小鼠制备、饲养及品系共享等过程中，容易造成病原微生物的感染。这些病原体不仅对实验结果产生干扰，对人类的健康也产生极大的威胁。因此，拥有标准化的SPF级实验小鼠是相关研究的基础，而感染小鼠通过生物净化方法达到SPF级标准是目前唯一有效的技术手段，生物净化方法主要包括剖宫取胎和胚胎移植。剖宫取胎操作相对简单，但存在净化不彻底和难以计算最佳剖宫时间等弊端；而胚胎移植则需要掌握扎实的胚胎移植技术。本实验以C57BL/6J野生型雌鼠为实验对象，对其注射不同剂量的孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促进腺激素(hCG) 进行超数排卵后，与剖宫取胎和胚胎移植两种方法相结合，通过比较分析平均卵母细胞数、平均胚胎数、受精率、见栓率、胚胎移植成活率，为生物净化提供优化方案。

1 材料和方法

1.1 实验动物及实验环境

4周龄SPF级C57BL/6J雌鼠108只，18～22 g，均来源于上海斯莱克实验动物有限公司 [SCXK(沪)2007-0005]，按照SFP级标准饲养于浙大实验动物中心屏障系统，自由饮水，室温(20±2)℃，光照12 h/d，(8∶00～20∶00)，经过1周的适应性饲养。

1.2 仪器与试剂

超净工作台，CO2恒温培养箱( Thermo )，体式解剖镜(Olympus SZ61 )，养皿 ( 35 mm，60 mm，Corning )，酒精灯，相差显微镜(Nikon SM2645)，镊子，口吸式移卵管；注射用血促性素(PMSG)、注射用绒促性素(HCG)购自宁波市三生药业有限公司，其余试剂均为Sigma公司产品。……