黄兆峰， 周欣欣， 黄红娟， 魏守辉， 陈景超， 杨 龙， 陈金奕， 张朝贤

(1.中国农业科学院植物保护研究所/中国农业科学院杂草鼠害生物学与治理重点实验室，北京 100193；2.农业部农药检定所，北京 100193)

草甘膦是一种广谱灭生性、内吸传导型除草剂，是国内外防除一年生及多年生杂草的主要药剂[1-6]。草甘膦的作用机制是抑制植物体内5-烯醇式丙酮酸-3-磷酸合成酶(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase，EPSPS)的活性，导致莽草酸大量积累，并抑制芳香族氨基酸的生物合成，进而扰乱正常的氮代谢[7]。以往研究表明：植物体内EPSPS基因的过量表达可以有效提高其对草甘膦的耐药性[8-11]。

田旋花(ConvolvulusarvensisL.)属旋花科，是一种多年生恶性杂草，其繁殖和再生能力极强，是华北地区小麦、玉米、大豆等旱作物田的重要杂草[12]。已被世界粮农组织列为世界上18种危害最严重的杂草之一[13]。DeGennaro等研究发现，无草甘膦用药史的田旋花对草甘膦具有天然的耐药性[14]；刘延等发现，北京房山麦田田旋花对草甘膦具有较高的耐药性，并首次克隆了田旋花EPSPS基因(GenBank登录号：EU698030)[12]；张猛比较了不同田旋花种群的耐药性水平，提出草甘膦处理后的EPSPS基因在表达时间和表达量上的差异是其对草甘膦产生耐药性差异的一个重要因素[13]。

本试验利用染色体步移技术克隆了田旋花EPSPS基因的启动子序列，并对其结构进行了分析。用该启动子与GUS报告基因连接转化农杆菌，花序侵染法侵染拟南芥，获得转EPSPS-P启动子拟南芥，为进一步了解田旋花EPSPS基因的表达调控机制奠定了基础。……