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应用细菌磁颗粒real-timeRT-PCR检测百合无症病毒

2014-08-10邓丛良双龙海陈继峰魏海燕

植物保护 2014年2期
关键词:检测方法

邓丛良,双龙海,孙 宁,2,陈继峰,魏海燕

(1.北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心,北京 101312; 2.东南大学生物科学与医学工程学院,南京 210096; 3.郑州大学生物工程系,郑州 450001)

应用细菌磁颗粒real-timeRT-PCR检测百合无症病毒

邓丛良1*,双龙海1,孙 宁1,2,陈继峰3,魏海燕1

(1.北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心,北京 101312; 2.东南大学生物科学与医学工程学院,南京 210096; 3.郑州大学生物工程系,郑州 450001)

为研究细菌磁颗粒分离提取不同样本材料中的植物病毒RNA的效果,以及结合实时荧光 RT-PCR技术检测LSV的灵敏性,选取感染病毒的西葫芦叶片(CGMMV和SqMV)、大豆种子(BPMV)与百合叶片(LSV和ArMV)3种样本材料,利用细菌磁颗粒分别提取这5种病毒RNA,与Trizol方法提取效果进行比较,同时与Trizol real-time RT-PCR检测LSV的灵敏度进行了比较。结果表明:BMPs方法能够从3种植物样本中提取病毒RNA,其检测LSV的灵敏性与Trizol方法相当。

细菌磁颗粒; 实时荧光 RT-PCR; 灵敏度

纳米材料是指在三维空间上至少有一维在0~100nm以内或者以此为基本结构单元而组成的材料,其具有小尺寸效应,量子效应,以及比表面积大等特性[1]。磁性纳米颗粒是一种单磁畴的纳米粒子,只有当处于外部磁场中才会显现出磁性,而且由于其尺寸小、比表面积大,能够与靶标物充分的结合,是用于固相分离的良好介质[2]。细菌磁颗粒是一种分离自趋磁细菌的生物纳米磁性颗粒,具有良好的生物相容性,表面主要由磷脂酰乙醇胺与磷脂酰甘油组成的磷脂膜包裹,表面分布有游离的氨基,能够进行通过物理吸附或借助化学偶联剂与功能生物分子或药物相连,可用于治疗、诊断以及检测等方面的应用[3-6]。……

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