杨 帆, 刘春来, 段立清

(1.黑龙江省农业科学院植物保护研究所，哈尔滨 150086； 2.内蒙古农业大学农学院，呼和浩特 010019)

球孢白僵菌SJ-05几丁质酶基因的克隆与序列分析

杨 帆1, 刘春来1, 段立清2*

(1.黑龙江省农业科学院植物保护研究所，哈尔滨 150086； 2.内蒙古农业大学农学院，呼和浩特 010019)

几丁质酶在昆虫真菌侵染寄主过程中起着重要的作用。本文对采自内蒙古准格尔旗沙棘木蠹蛾的球孢白僵菌菌株SJ-05进行了几丁质酶的基因分析，从中克隆了几丁质酶Bbchit基因，得到了重组质粒pMD19-T/chit。测序结果表明，Bbchit基因核苷酸序列阅读框架全长为1047 bp，编码348个氨基酸，推测分子量为36.924 ku，等电点为5.94。氨基酸序列比对结果表明，与球孢白僵菌Bb0062菌株(AAN41259.1)的氨基酸序列相似性最高，为99.71%。

球孢白僵菌； 几丁质酶基因； 基因克隆； 序列分析

沙棘是我国黄土丘陵区的水土保持树种之一，也是当地主要薪炭材，整株植株均含有丰富的营养和生物活性物质，具有较高的综合开发利用价值。但是，近年来，沙棘木蠹蛾(HolcocerushippophaecolusHua,Chou,FangetChen)时有发生，为害严重，造成沙棘林大面积死亡。内蒙古鄂尔多斯市沙棘木蠹蛾发生面积大，约1.8万hm2，平均有虫株率高达42%[1]。调查发现白僵菌是沙棘木蠹蛾幼虫、蛹的主要病原物，是值得开发利用的病原物之一。

球孢白僵菌[Beauveriabassiana(Balsamo) Vuillemin]是常见的昆虫病原真菌之一，寄主范围广，致病力强，对人、畜、天敌无毒害，不污染环境，广泛应用于农林害虫的生物防治。昆虫病原菌在入侵寄主体壁的过程中会产生相关的酶类，其中主要是蛋白酶、几丁质酶及脂酶等水解酶类[2]。……