赵铁军， 倪伟海， 郑有芳， 郭一孚， 蒋欢乐， 徐 怡

(浙江师范大学 化学与生命科学学院,浙江 金华 321004)

慢病毒(lentivirus)属逆转录病毒科(Retrovidae)，它主要包括8种能够感染人和脊椎动物的RNA病毒.此类病毒的共同之处在于它们都具有逆转录病毒的基本结构和特性[1].慢病毒载体(lentiviral vector，LV)系统是以慢病毒基因组为基础、人工改造构建而成的一种病毒载体.它利用慢病毒的高感染性、高表达性、可感染分裂细胞和非分裂细胞等诸多特性，通过感染细胞或组织，实现外源基因在细胞或组织中持续稳定的表达[2].由于具有上述优点，慢病毒载体作为一种新型的生物资源已成为当前生物及医学相关领域的研究热点[3].

1 慢病毒载体

1.1 慢病毒载体的构建

应用最为广泛的慢病毒载体系统包含整合质粒、包装质粒和包膜质粒.整合质粒主要含有包装、逆转录及整合所必须的作用原件，而且具有多克隆位点，及插入到该位点的目的基因.包膜质粒和包装质粒构成了慢病毒载体的包装系统，它提供慢病毒包装所需的蛋白质外壳部分.病毒外壳主要由gag，pol，env和rev蛋白所组成，它们大多来自水泡性口炎病毒包膜蛋白(vesicular stomatitis virus G-protein，VSV-G).在慢病毒载体构建过程中，首先使整合质粒、包装质粒和包膜质粒混合成三质粒混合体系，然后用该混合体系转染用于包装的细胞株，最后培养得到所需的慢病毒载体(见图1).

图1 慢病毒载体的形成过程

1.2 慢病毒载体的优势

利用慢病毒载体导入外源基因主要有以下优势[4-5]：第一，慢病毒载体感染对象广，可转染处于有丝分裂期和非有丝分裂期的细胞；……