土壤中一株产黑色素微生物的分离与鉴定
2014-08-06阎春兰代金刚王恒涛邱裕尧
中南民族大学学报(自然科学版) 2014年3期
关键词:生长
阎春兰,代金刚,王恒涛,邱裕尧,王 茜
(中南民族大学 生命科学学院,微生物与生物转化重点实验室 武汉 430074)
黑色素是一种广泛存在于动物、植物和微生物中,颜色从棕色到黑色,结构较为复杂的非均质类多酚聚合体.这种色素并非对生物的生长和发育必不可少,但却能够提高生物的生存和竞争能力[1].黑色素应用潜力巨大,作为紫外线吸收剂、自由基清除剂、抗氧化剂、无定形的半导体、生物杀虫剂的光保护剂和新型的天然药物载体,可用于治疗某些与黑色素缺乏有关的神经系统疾病.近年来发现一些可溶性黑色素在体外对艾滋病病毒有显著的抑制作用,使天然黑色素可望成为一种新的抗艾滋病药物[2,3].
为获得高产胞外黑色素的优良菌株,本文从土壤中分离筛选得到一株产黑色素链霉菌,并研究和鉴定了其产黑色素性质和部分生理生化特征,为后期优化产黑色素的条件提供了良好的理论基础.
1 材料和方法
1.1 材料
实验中所用土壤来自中南民族大学校园.培养基:采用牛肉膏蛋白胨培养基(牛肉膏3.0 g,蛋白胨10.0 g,NaCl 5.0 g,水1000 mL,pH 7.0~7.2). pMD18-T载体、Taq聚合酶(Takara公司),T4 DNA连接酶(MBI生物公司),16S rDNA 的测序(北京三博远志公司).UV757CRT紫外可见分光光度计(UV757CRT,上海精密科学仪器有限公司). PCR仪(T-personal 48, Biometra公司).
1.2 方法
土壤中的微生物采用稀释涂布平板法,对稀释涂布平板法得到的单菌落,通过平板划线分离法进行纯化.将纯化的菌体振荡培养至对数期,离心收集菌体,抽提基因组DNA. PCR扩增菌体基因组16S rDNA.引物……
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