陈强，吴春雪，余晓君，李红，朱春晖，刘晓艳

（1.江西省儿童医院内科，江西南昌330006；2.江西省儿童医院检验科，江西南昌330006；3.江西省儿童医院中心实验室，江西南昌330006；4.南昌大学医学部，江西南昌330006）

鼠伤寒沙门菌spvC基因缺陷变异株的制备

陈强1，吴春雪1，余晓君2，李红3，朱春晖1，刘晓艳4

（1.江西省儿童医院内科，江西南昌330006；2.江西省儿童医院检验科，江西南昌330006；3.江西省儿童医院中心实验室，江西南昌330006；4.南昌大学医学部，江西南昌330006）

目的：为进一步研究鼠伤寒沙门菌毒力基因spvC的功能，制备鼠伤寒沙门菌spvC基因缺陷变异株。方法：根据鼠伤寒沙门菌spvC基因序列，设计PCR特异性引物，制备spvC基因缺陷性同源性核苷酸片段，导入自杀质粒pCVD442后再导入鼠伤寒沙门菌野生株，进行同源重组，用PCR观察重组现象，将完全重组的菌株作为spvC基因的缺陷变异株，并通过核苷酸序列分析加以确定。结果：PCR及序列分析证实，缺陷变异株的spvC基因缺失711个碱基。结论：成功构建鼠伤寒沙门菌spvC基因缺陷变异株，为进一步研究其在鼠伤寒沙门菌中的功能奠定了基础。

鼠伤寒沙门菌；spv C；基因缺陷变异；同源重组

在所有的致病沙门菌毒力质粒上均有一大小约8 kb的高度保守序列，即沙门菌质粒毒力基因spv（Salmonella plasmid virulence gene），既往研究发现它编码的产物与细菌毒力表型密切相关，并与细菌血清抗性及其黏附、定居能力相关［1－3］。spv基因包含R、A、B、C、D等5个开放阅读框［4］。spv五大结构基因中对细菌毒力有重要影响的基因为spvB、 spvC，后两者的编码产物均通过沙门菌毒力岛Ⅱ编码的Ⅲ型分泌系统（typeⅢprotein secretion systems，TTSS）进入宿主细胞，从而发挥其毒力效应［5］。……