血清microRNA表达谱对原发性胆汁性肝硬化的诊断价值
2014-08-04潘腾莉孙莉周兴蓓陈丽於学军谭友文
潘腾莉,孙莉,周兴蓓,陈丽,於学军,谭友文
(1.江苏大学临床医学院,江苏镇江212001;2.镇江市第三人民医院肝病科,江苏镇江212005)
血清microRNA表达谱对原发性胆汁性肝硬化的诊断价值
潘腾莉1,2,孙莉2,周兴蓓2,陈丽2,於学军2,谭友文2
(1.江苏大学临床医学院,江苏镇江212001;2.镇江市第三人民医院肝病科,江苏镇江212005)
目的:寻找原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者血清中差异表达的microRNAs。方法:首先,将PBC组和健康对照组血清标本各3例各自混合,采用Illumina GAⅡx高通量测序技术分析上述2组样本,筛选出PBC患者与健康对照者表达差异有统计学意义的miRNAs;其次,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对差异表达的miRNAs在扩大标本中进行验证。最后,预测miRNAs的靶基因并进一步分析其作用。结果:高通量测序技术筛选出143条miRNAs表达差异有统计学意义,其中,22条差异倍数>2倍。经过qRT-PCR验证,miR-122,miR-141,miR-34a在PBC组中的表达水平明显高于对照组,与测序结果表达趋势一致。靶基因预测结果显示,在细胞核和细胞质中,miRNAs主要通过与蛋白质结合发挥信号转导的作用。结论:PBC患者存在差异表达的miRNAs,且其对PBC的诊断有一定的参考价值。
原发性胆汁性肝硬化;miRNA;高通量测序
MicroRNA(miRNA)是长度18~22 bp的核苷酸序列,通过3′UTR区域与宿主mRNA结合,降解或抑制其表达。研究表明,miRNA在机体发育、肿瘤形成和转移、细胞凋亡和坏死等众多病理生理过程中发挥着重要的调控作用。其中,研究最多的是miRNA对肿瘤发生发展及预后的调控作用[1-4]。近年来,miRNA与免疫调节机制的作用受到越来越多的关注[5-7]。原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)是一种原……