高糖条件下心脏成纤维细胞对心肌细胞肥大的影响
2014-08-04赵龙刘玲玲李晓丽周艳芳王好张赢予孔彪沈冬丽张国辉
赵龙,刘玲玲,李晓丽,周艳芳,王好,张赢予,孔彪,沈冬丽,张国辉
(江苏大学附属人民医院心内科,江苏镇江212002)
高糖条件下心脏成纤维细胞对心肌细胞肥大的影响
赵龙,刘玲玲,李晓丽,周艳芳,王好,张赢予,孔彪,沈冬丽,张国辉
(江苏大学附属人民医院心内科,江苏镇江212002)
目的:研究高糖条件下心脏成纤维细胞对心肌细胞肥大的影响。方法:将体外分离培养的SD乳鼠心肌细胞、心脏成纤维细胞随机分为心肌细胞低糖组(A组),心肌细胞高糖组(B组),心肌细胞、心脏成纤维细胞共培养高糖组(C组),心肌细胞、心脏成纤维细胞共培养加转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)中和抗体高糖组(D组),心脏成纤维细胞低糖组(E组),心脏成纤维细胞高糖组(F组)。培养0,6,12,24,48,72 h后,倒置显微镜观察细胞形态、拍照并计算心肌细胞表面积,RT-PCR检测心肌细胞肥大标志物心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)mRNA表达水平,ELISA检测各组培养液中TGF-β1表达量。结果:培养48 h时,B组心肌细胞表面积比A组显著增加(P<0.05),而C组在培养24 h时心肌细胞表面积已显著高于A组(P<0.05)。RT-PCR显示B组和D组细胞在培养12 h时,ANP、β-MHCmRNA显著升高(P<0.05),培养24 h时达高峰;而C组在培养6 h时ANP、β-MHCmRNA即显著升高(P<0.05),培养12 h时达高峰。ELISA检测结果显示,培养12 h起B组、D组TGF-β1的表达均显著高于A组(P<0.05),而在培养6 h时C组TGF-β1的表达即已显著高于A组(P<0.05)。F组各时间点成纤维细胞TGF-β1的表达均高于E组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:心脏成纤维细胞在高糖条件下可能通过旁分泌TGF-β1促进心肌细胞的肥大。
高糖;心脏成纤维细胞;心肌细胞;转化生长因子β1;心肌肥大
糖尿病心……