姜贺果，戴春华，李坚，陈永昌，蓝婷，伍敏

（1.江苏大学附属医院呼吸科，江苏镇江212001；2.江苏大学基础医学研究所，江苏镇江212013）

siRNA沉默FANCD2基因增加肺癌A549／DDP细胞对顺铂化疗的敏感性

姜贺果1，戴春华1，李坚1，陈永昌2，蓝婷2，伍敏2

（1.江苏大学附属医院呼吸科，江苏镇江212001；2.江苏大学基础医学研究所，江苏镇江212013）

目的：研究siRNA沉默FANCD2基因后人肺腺癌A549／DDP耐药细胞株对顺铂（DDP）耐药性的变化。方法：合成针对FANCD2基因的siRNA（FANCD2-siRNA），采用脂质体将其分别转染肺癌A549细胞株和A549／DDP耐药细胞株。CCK-8法测定经DDP处理的A549和A549／DDP细胞株转染siRNA前后的细胞增殖率变化；免疫印迹法测定2种细胞株转染siRNA前后FANCD2蛋白单泛素化水平；免疫荧光测定胞核中FANCD2蛋白核聚小体的形成。结果：经DDP处理的A549／DDP细胞增殖率，FANCD2蛋白单泛素化水平及核聚小体形成程度明显高于A549细胞。转染FANCD2-siRNA后，A549和A549／DDP细胞的FANCD2蛋白单泛素化水平和核聚小体形成明显降低，细胞增殖率显著下降。结论：应用siRNA转染技术沉默FANCD2基因可抑制FA／BRCA途径的DNA修复功能，从而增加肺癌细胞对DDP的敏感性，部分逆转耐药肺癌细胞株对DDP的耐药性。

肺癌细胞；顺铂；耐药性；FA／BRCA途径；FANCD2；siRNA

肺癌在世界范围内的发病率和病死率均居各种恶性肿瘤的首位。顺铂（DDP）是肺癌各种化疗方案中的基本药物，其作用机制是结合于DNA链，致其双链交联和断裂，阻滞其复制和转录，进而引起细胞损伤和凋亡。DDP具有抗癌谱广、抗癌作用强等特点，但其日益增高的肿瘤耐药性和毒副作用限制了临床的广泛应用。既往研究显示，肿瘤细胞对DDP耐药包含多种机制：铜转运蛋白CTR1表达下降；……