侯艳娇，罗欲承，邵晨，倪颖，邵世和

（1.江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江212013；2.兴化市人民医院检验科，江苏泰州225700）

快速检测肺炎链球菌recA、ply及16S rRNA基因的多重降落PCR方法建立及应用

侯艳娇1，罗欲承2，邵晨1，倪颖1，邵世和1

（1.江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江212013；2.兴化市人民医院检验科，江苏泰州225700）

目的：建立快速检测肺炎链球菌recA、ply及16S rRNA基因的多重降落PCR方法并应用。方法：设计肺炎链球菌的特异基因recA、ply及其菌属保守序列16S rRNA基因的引物，建立多重降落PCR的反应体系及条件，通过该方法检测13株标准菌株的基因以判定recA、ply、16S rRNA基因的检测特异性；并通过对不同稀释度肺炎链球菌DNA的检测判定该方法的灵敏度。最后，应用多重降落PCR方法检测98份痰标本的肺炎链球菌，并与细胞培养法进行比较。结果：建立的多重降落PCR方法检测肺炎链球菌的特异性达100%，灵敏度达5 pg／μL，该方法对98份痰标本中肺炎链球菌的检测结果与细胞培养法一致。结论：成功建立检测肺炎链球菌的多重降落PCR方法，灵敏度高，特异性强，可用于临床标本肺炎链球菌的快速检测。

肺炎链球菌；多重降落PCR；临床标本

肺炎链球菌（Streptococcus pneumonia，SP）是细菌性感染的主要病原体之一，在世界范围内引起较高的发病率和死亡率，既可导致败血症、脑膜炎等侵袭性感染，也可导致中耳炎、肺炎等非侵袭性感染［1］。我国每年因SP相关性疾病导致的儿童死亡人数位居全球前10列［2］。该菌培养要求较高，耗时且培养检出率较低，特别是已使用抗生素的患者标本中更加难以分离。……