同位素稀释-气相色谱-质谱法检测大鼠血浆中的内源性胍丁胺
2014-08-03丘忠丽熊志立谢剑炜
丘忠丽, 林 缨, 熊志立, 谢剑炜*
(1.抗毒药物与毒理学国家重点实验室,军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850;2.沈阳药科大学药学院,辽宁 沈阳110016)
胍丁胺(agmatine,Agm)是精氨酸在细胞线粒 体膜上左旋精氨酸脱羧酶(L-arginine decarboxy-lase,L-ADC)催化作用下的脱羧产物。1994年Li等[1]首次从哺乳动物体内成功分离检测到胍丁胺。内源性胍丁胺及其相应受体可能在中枢神经系统内构成了阿片功能的调节系统[2]。外源性胍丁胺具有增强吗啡镇痛、降低其成瘾性和抗耐受作用[3]以及明显的抗抑郁、抗焦虑作用[4],能够抑制阿片依赖和复吸[5],而内源性胍丁胺在阿片依赖发生发展中的作用尚属未知。内源性胍丁胺的高灵敏度、高特异性分析方法的建立,对于监测内源性胍丁胺在生物体内的变化,进而阐明内/外源性胍丁胺作为候选神经递质的基本生物学特征以及在阿片依赖和复吸发生发展中的作用具有重要意义。
胍丁胺无紫外和荧光吸收,极性大,自身难以气化,因此在常规的气相色谱、液相色谱及其联用质谱上均难以直接检测,现有的检测方法主要通过衍生化反应来实现。目前文献报道的检测方法主要有高效 液 相 色 谱 法 (HPLC)[6-11]、气 相 色 谱 法(GC)[12-14]、毛细管电泳法[15,16]和酶联免疫吸附法(ELISA)[17]等。其中,HPLC 常用衍生化试剂如邻苯二 甲 醛-β-巯 基 乙 醇 (OPA-ME)[6,7]、萘 二 甲 醛(NDA)[8]等衍生化后,采用荧光[6-8,10]或质谱[11]检测器检测,但由于衍生化后造成基底干扰严重,不适用于复杂基质中胍丁胺的高灵敏检测。GC和GCMS是较常用的检测方法。Kawabata等……
