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培养基基本成分对太行菊不定芽增殖与生长的影响

2014-07-16赵元增等

江苏农业科学 2014年3期

赵元增等

摘要:以太行菊的无菌不定芽为材料,以MS、N6、B5、Nitsch基本培养基为基础,研究不同培养基及其基本成分组合处理对太行菊不定芽增殖与生长的影响。结果表明:不同类型基本培养基对太行菊不定芽增殖与生长影响较大,在MS基本培养基上太行菊不定芽增殖与生长的表现最好,N6培养基次之,而在Nitsch、B5基本培养基上的培养效果很差,芽块较小且不定芽枯死严重;培养基中大量元素构成对太行菊不定芽的增殖与生长影响最大,而培养基中微量元素、有机物质构成对其培养的影响较小;糖浓度过高(5%)不利于太行菊不定芽的增殖与生长,而在1.5%~3%糖浓度范围内,不定芽增殖与生长状况相差不大;相同浓度下蔗糖较食糖更适宜太行菊不定芽的增殖与生长。

关键词:太行菊;不定芽;离体培养;增殖系数

中图分类号:S682.1+10.4+3 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2014)03-0041-03

太行菊[Opisthopappus taihangensis (Ling) Shih]是菊科太行菊属多年生宿根草本植物,为我国太行山区特有珍稀物种,仅见于河南省、陕西省、河北省交界的太行山区[1-2]。由于分布区域狭窄,生长环境险峻,繁殖能力较弱,太行菊现处于濒危状态,已被列为国家珍稀保护植物及河南省重点保护植物[1-2]。太行菊兼具观赏价值与较高的医疗保健价值[3],也是菊花杂交育种的理想遗传材料[4]。有关太行菊的研究主要集中于太行菊花粉形态、减数分裂、菊属远缘杂交等[4-8],而对太行菊离体繁殖方面的研究极少,仅见姚连芳等[9]、王建博等[10]的2篇报道。这些研究中均以MS培养基为基本培养基,而关于其他培养基(如N6、B5、Nitsch等)及培养基中成分组成对太行菊离体培养作用的研究还未见报道。由于太行菊多生长于向阳裸露崖壁或岩石缝隙中[2-3],所处生境土壤稀少,有机质、全氮含量较低,钙含量较高[11]。考虑太行菊的独特生境,MS基本培养基成分对太行菊的生长发育并不一定完全适宜。本研究以MS培养基为对照,研究 3种常用培养基(N6、B5、Nitsch)及不同基本培养基的成分组合对太行菊不定芽增殖与生长的影响,以期筛选出适于太行菊增殖与生长的理想培养条件,进而建立高效稳定的太行菊离体繁殖技术体系。

1 材料与方法

1.1 材料

太行菊采自新乡关山国家地质公园,接种材料为太行菊无菌不定芽。

1.2 培养基配制

各培养基编号及其基本成分见表1。

1.3 接种与培养

在超净工作台上选择长势旺盛且大小一致的太行菊不定芽块,将其切成1 cm3大小,然后分别接种于以上各种培养基中,每种培养基接种20瓶,每瓶接种3块不定芽块。接种时不定芽块基部嵌入培养基,但不定芽生长点要外露。

培养温度24~26 ℃,光照强度1 500~2 000 lx,光照时间12 h/d。

1.4 调查项目与方法

接种后7 d观察、记录不定芽开始增殖的情况,以后定期观察不定芽增殖情况及其长势。接种培养40 d时记录各处理的接种不定芽块总数、芽块大小、不定芽长势(不定芽的叶色、叶片长度、叶片枯死情况等)等项目。然后将增殖后的不定芽块切割成与接种时一致大小(1 cm3),统计各处理增殖后芽块的分割总块数,并计算各处理不定芽增殖系数。

不定芽增殖系数=增殖后芽块的分割总块数/接种芽块总数。

2 结果与分析

2.1 不同基本培养基对太行菊不定芽增殖与生长的影响

由表2可见,在4种不同基本培养基上太行菊不定芽增殖与生长状况存在较大差异。在MS基本培养基(Ⅰ-1)上太行菊不定芽增殖与生长状况表现最好,芽块上产生大量不定芽,芽块大小与不定芽增殖系数均达到最大值。并且在该培养基上,不定芽生长正常,长势旺盛,较大不定芽叶片长度可以达到5~10 mm。不定芽块中虽有黄褐色的枯死叶片,但数量极少。与Ⅰ-1处理相比,N6基本培养基(Ⅰ-2)处理最显著的变化是形成的不定芽较小,芽块变小。虽然在该培养基上也有大量不定芽的分化,但不定芽细小,叶色淡黄,叶片长度多为3~4 mm,甚至更小。在B5基本培养基(Ⅰ-3)、Nitsch基本培养基(Ⅰ-4)中,太行菊不定芽增殖与生长状况表现更差,不仅芽块小,不定芽增殖系数低,且不定芽长势弱,不定芽叶片卷曲,呈水浸状,黄色至褐色,芽块中夹杂较多的枯死叶片。特别是B5培养基上芽块中夹杂大量褐色枯死叶片,甚至整个芽块变褐枯死。

由此可知,在所采用的4种基本培养基中,MS基本培养基较适合太行菊不定芽的增殖与生长,N6基本培养基次之,而Nitsch、B5基本培养基不适合太行菊的离体培养。特别是B5基本培养基不仅使不定芽增殖严重受阻,而且还会导致大量不定芽枯死。

在大量元素与有机物质构成相同,仅存在微量元素构成差异的2组培养基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5为1组,Ⅱ-2、Ⅱ-6为1组)中,就太行菊不定芽的增殖与生长状况而言,虽然组别间存在较大差异,但在每组内各处理间太行菊不定芽的增殖与生长状况差异很小。这进一步表明,不同培养基间微量元素构成差异对太行菊离体培养的影响较小,而培养基间大量元素的种类与含量差异对太行菊不定芽增殖与生长起关键作用。

同样,在大量元素与微量元素构成相同,仅存在有机物质构成差异的2组培养基中(Ⅱ-1、Ⅱ-7为1组,Ⅱ-2、Ⅱ-8为1组),同组内不同培养基间的离体培养结果差异均很小。这表明,培养基中有机物质的构成差异对太行菊不定芽增殖与生长的影响较小。

2.3 糖种类与浓度对太行菊不定芽增殖与生长的影响

MS基本培养基中糖种类与浓度对太行菊不定芽的增殖与生长状况影响较大。由表4可知,当培养基中添加蔗糖时,不同蔗糖浓度处理对太行菊不定芽增殖与生长均有影响。当蔗糖浓度为1.5%、3%时(Ⅲ-1、Ⅲ-2处理),芽块上均有大量不定芽分化,不定芽增殖系数与芽块大小在2个处理间相近。但在蔗糖浓度较低的Ⅲ-1培养基上,太行菊不定芽生长状况更好,芽块蓬松鲜绿,不定芽生长整齐、旺盛,富有生机,芽块中几乎看不到黄化枯死的叶片。当培养基中蔗糖浓度提高到5%时(Ⅲ-3处理),不定芽分化与生长严重受阻,整个芽块呈淡黄色,芽块表面布满大量淡黄色的颗粒状小芽或点状突起。较大的不定芽数量少,并且叶片呈水浸状,黄色至黄褐色,叶片长度也仅有3~5 mm。

当培养基中添加食糖时,不同食糖浓度下太行菊不定芽的增殖与生长表现与不同蔗糖浓度下的表现相类似。在较低食糖浓度下(1.5%、3%),太行菊不定芽增殖与生长较好;在过高的食糖浓度(5%)下,太行菊不定芽增殖与生长表现很差。当食糖、蔗糖浓度相同时,太行菊不定芽增殖与生长状况差异较小,除在蔗糖培养基上的不定芽稍大外,对应糖浓度下的芽块大小、不定芽增殖系数等都相差不大。

综合分析,无论是使用蔗糖还是食糖,糖浓度过高(5%)将严重抑制太行菊不定芽的生长,引起不定芽生长停滞,分化数量减少;1.5%、3%糖浓度对太行菊不定芽的增殖与生长较适宜,特别是在1.5%糖浓度下不定芽生长更为旺盛,芽块中枯死叶片极少。在培养基中添加适宜浓度蔗糖的培养效果稍好于食糖,但差别并不大。

3 结论与讨论

有关太行菊离体培养的研究报道很少,在已有研究中,研究者一般采用MS培养基作为基本培养基。从理论上讲,MS培养基中无机盐浓度较高,微量元素及有机成分齐全而丰富,对多数植物的增殖培养而言,是较为理想的一种基本培养基。但太行菊生境土壤贫瘠,缺乏植物生长所需的营养,何种类型培养基更适合太行菊的离体培养,有必要进一步研究。

本研究以MS培养基(高无机盐培养基)为对照,研究B5、N6(高硝酸钾含量培养基,其中B5培养基有机物质含量高)和Nitsch(中等无机盐含量培养基,有机物质种类较全)3种基本培养基及其基本成分(大量元素、微量元素、有机物质)的不同搭配组合对太行菊离体培养的影响。

研究结果表明,太行菊不定芽在MS、B5、N6、Nitsch 4种基本培养基上的增殖与生长状况存在较大差异:在MS、N6基本培养基上,接种芽块均产生大量不定芽,并且不定芽生长基本正常,叶色鲜绿,芽块中黄化枯死的叶片都很少。不定芽在这2种培养基上生长的主要差异是N6培养基处理的不定芽较小,叶片窄短。在Nitsch、B5培养基上太行菊不定芽分化数量大幅度减少,增殖系数降低,且不定芽长势差,出现较多黄色至褐色的枯死不定芽。特别是在B5培养基上,芽块中不定芽枯死更严重,甚至整个芽块变褐枯死。B5、N6培养基都属于高无机盐含量、高KNO3含量培养基,按照本研究结果,不同培养基中微量元素与有机物质的构成差异对不定芽增殖与生长的影响较小,那么在这2种基本培养基上太行菊不定芽离体培养的差异应当是由于两者在大量元素组成上的差异引起。相对于N6、MS基本培养基,B5培养基的大量元素中CaCl2·2H2O用量显著降低,不含KH2PO4,硝态氮与铵态氮比例加大,是否由其中1种或多种因素以及其他因素造成太行菊离体培养差异,还须要进一步研究。

不同基本培养基大量元素、微量元素、有机成分的种类与含量各有特点,基本培养基之间基本成分的不同搭配组合,有望获得最适宜太行菊不定芽增殖与生长的基本培养基。与标准MS、B5、N6、Nitsch基本培养基相比,基于这4种基本培养基的4种组合培养基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅱ-7培养基)对太行菊不定芽增殖与生长有明显促进作用,太行菊在这些组合培养基上的离体培养效果均好于未改动的基本培养基。而由N6培养基大量元素与B5培养基微量元素、有机物质组合而成的Ⅱ-5培养基,在本研究中对太行菊离体培养的效果最好。

培养基中糖浓度对太行菊不定芽的增殖与生长有较大影响。糖浓度过高对太行菊不定芽的分化与生长产生抑制,在芽块表面往往形成大量颗粒状突起或芽点,而缺少伸长生长的不定芽。在一定范围内,适当降低培养基中糖浓度有利于不定芽的生长,减少枯死叶片的发生。在相同糖浓度下,在培养基中添加蔗糖的培养效果要稍好于食糖,但两者相差不大。食糖价格远低于蔗糖,若能用食糖替代蔗糖作为培养基碳源,将会大大降低离体培养中的生产成本。1.5%、3%食糖都可以用于太行菊不定芽的离体培养,3%食糖处理的太行菊不定芽增殖系数稍高,但1.5%食糖处理的不定芽长势更旺,芽块中枯叶更少。在兼顾太行菊不定芽增殖与生长的前提下,若进行太行菊组培苗的规模化生产,在培养基中添加1.5%食糖是较理想的选择。

参考文献:

[1]丁保章,王遂义. 河南植物志:第3册[M]. 郑州:河南科学技术出版社,1997:632.

[2]卢炯林,王磐基. 河南省珍稀濒危保护植物[M]. 开封:河南大学出版社,1990:197-199.

[3]刘 莹,孙跃枝,田转运. 太行菊的生物学特性及保护利用[J]. 湖北农业科学,2012,51(17):3775-3776.

[4]胡 枭,赵惠恩. 太行菊属与菊属亚菊属远缘杂交试验初报[J]. 现代农业科学,2008,15(6):13-14.

[5]李 健,陈发棣,陈素梅,等. 太行菊和芙蓉菊花粉母细胞减数分裂过程[J]. 南京农业大学学报,2009,32(4):43-46.

[6]高亚卉,戴攀峰,姬志峰,等. 太行菊属植物花粉形态研究[J]. 西北植物学报,2011,31(12):2464-2472.

[7]何敏杰,程月琴,王红卫,等. 太行菊DNA提取和ISSR标记的筛选与优化[J]. 中国农学通报,2012,28(16):202-207.

[8]桑叶子,孙 明,张启翔. 太行菊细胞悬浮培养体系的建立[J]. 河南农业大学学报,2011,45(2):177-182.

[9]姚连芳,董美华,毛玉收.太行菊组织培养研究[J]. 中国农学通报,2004,20(6):29-31.

[10]王建博,徐思明,董 鹏,等. 太行菊顶芽离体高效再生系的建立[J]. 首都师范大学学报:自然科学版,2008,29(5):45-50.

[11]沈世华,陆文梁,王伏雄. 太行花生殖生物学研究:太行花生境的分析[J]. 生物多样性,1994,2(4):210-212.

当培养基中添加食糖时,不同食糖浓度下太行菊不定芽的增殖与生长表现与不同蔗糖浓度下的表现相类似。在较低食糖浓度下(1.5%、3%),太行菊不定芽增殖与生长较好;在过高的食糖浓度(5%)下,太行菊不定芽增殖与生长表现很差。当食糖、蔗糖浓度相同时,太行菊不定芽增殖与生长状况差异较小,除在蔗糖培养基上的不定芽稍大外,对应糖浓度下的芽块大小、不定芽增殖系数等都相差不大。

综合分析,无论是使用蔗糖还是食糖,糖浓度过高(5%)将严重抑制太行菊不定芽的生长,引起不定芽生长停滞,分化数量减少;1.5%、3%糖浓度对太行菊不定芽的增殖与生长较适宜,特别是在1.5%糖浓度下不定芽生长更为旺盛,芽块中枯死叶片极少。在培养基中添加适宜浓度蔗糖的培养效果稍好于食糖,但差别并不大。

3 结论与讨论

有关太行菊离体培养的研究报道很少,在已有研究中,研究者一般采用MS培养基作为基本培养基。从理论上讲,MS培养基中无机盐浓度较高,微量元素及有机成分齐全而丰富,对多数植物的增殖培养而言,是较为理想的一种基本培养基。但太行菊生境土壤贫瘠,缺乏植物生长所需的营养,何种类型培养基更适合太行菊的离体培养,有必要进一步研究。

本研究以MS培养基(高无机盐培养基)为对照,研究B5、N6(高硝酸钾含量培养基,其中B5培养基有机物质含量高)和Nitsch(中等无机盐含量培养基,有机物质种类较全)3种基本培养基及其基本成分(大量元素、微量元素、有机物质)的不同搭配组合对太行菊离体培养的影响。

研究结果表明,太行菊不定芽在MS、B5、N6、Nitsch 4种基本培养基上的增殖与生长状况存在较大差异:在MS、N6基本培养基上,接种芽块均产生大量不定芽,并且不定芽生长基本正常,叶色鲜绿,芽块中黄化枯死的叶片都很少。不定芽在这2种培养基上生长的主要差异是N6培养基处理的不定芽较小,叶片窄短。在Nitsch、B5培养基上太行菊不定芽分化数量大幅度减少,增殖系数降低,且不定芽长势差,出现较多黄色至褐色的枯死不定芽。特别是在B5培养基上,芽块中不定芽枯死更严重,甚至整个芽块变褐枯死。B5、N6培养基都属于高无机盐含量、高KNO3含量培养基,按照本研究结果,不同培养基中微量元素与有机物质的构成差异对不定芽增殖与生长的影响较小,那么在这2种基本培养基上太行菊不定芽离体培养的差异应当是由于两者在大量元素组成上的差异引起。相对于N6、MS基本培养基,B5培养基的大量元素中CaCl2·2H2O用量显著降低,不含KH2PO4,硝态氮与铵态氮比例加大,是否由其中1种或多种因素以及其他因素造成太行菊离体培养差异,还须要进一步研究。

不同基本培养基大量元素、微量元素、有机成分的种类与含量各有特点,基本培养基之间基本成分的不同搭配组合,有望获得最适宜太行菊不定芽增殖与生长的基本培养基。与标准MS、B5、N6、Nitsch基本培养基相比,基于这4种基本培养基的4种组合培养基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅱ-7培养基)对太行菊不定芽增殖与生长有明显促进作用,太行菊在这些组合培养基上的离体培养效果均好于未改动的基本培养基。而由N6培养基大量元素与B5培养基微量元素、有机物质组合而成的Ⅱ-5培养基,在本研究中对太行菊离体培养的效果最好。

培养基中糖浓度对太行菊不定芽的增殖与生长有较大影响。糖浓度过高对太行菊不定芽的分化与生长产生抑制,在芽块表面往往形成大量颗粒状突起或芽点,而缺少伸长生长的不定芽。在一定范围内,适当降低培养基中糖浓度有利于不定芽的生长,减少枯死叶片的发生。在相同糖浓度下,在培养基中添加蔗糖的培养效果要稍好于食糖,但两者相差不大。食糖价格远低于蔗糖,若能用食糖替代蔗糖作为培养基碳源,将会大大降低离体培养中的生产成本。1.5%、3%食糖都可以用于太行菊不定芽的离体培养,3%食糖处理的太行菊不定芽增殖系数稍高,但1.5%食糖处理的不定芽长势更旺,芽块中枯叶更少。在兼顾太行菊不定芽增殖与生长的前提下,若进行太行菊组培苗的规模化生产,在培养基中添加1.5%食糖是较理想的选择。

参考文献:

[1]丁保章,王遂义. 河南植物志:第3册[M]. 郑州:河南科学技术出版社,1997:632.

[2]卢炯林,王磐基. 河南省珍稀濒危保护植物[M]. 开封:河南大学出版社,1990:197-199.

[3]刘 莹,孙跃枝,田转运. 太行菊的生物学特性及保护利用[J]. 湖北农业科学,2012,51(17):3775-3776.

[4]胡 枭,赵惠恩. 太行菊属与菊属亚菊属远缘杂交试验初报[J]. 现代农业科学,2008,15(6):13-14.

[5]李 健,陈发棣,陈素梅,等. 太行菊和芙蓉菊花粉母细胞减数分裂过程[J]. 南京农业大学学报,2009,32(4):43-46.

[6]高亚卉,戴攀峰,姬志峰,等. 太行菊属植物花粉形态研究[J]. 西北植物学报,2011,31(12):2464-2472.

[7]何敏杰,程月琴,王红卫,等. 太行菊DNA提取和ISSR标记的筛选与优化[J]. 中国农学通报,2012,28(16):202-207.

[8]桑叶子,孙 明,张启翔. 太行菊细胞悬浮培养体系的建立[J]. 河南农业大学学报,2011,45(2):177-182.

[9]姚连芳,董美华,毛玉收.太行菊组织培养研究[J]. 中国农学通报,2004,20(6):29-31.

[10]王建博,徐思明,董 鹏,等. 太行菊顶芽离体高效再生系的建立[J]. 首都师范大学学报:自然科学版,2008,29(5):45-50.

[11]沈世华,陆文梁,王伏雄. 太行花生殖生物学研究:太行花生境的分析[J]. 生物多样性,1994,2(4):210-212.

当培养基中添加食糖时,不同食糖浓度下太行菊不定芽的增殖与生长表现与不同蔗糖浓度下的表现相类似。在较低食糖浓度下(1.5%、3%),太行菊不定芽增殖与生长较好;在过高的食糖浓度(5%)下,太行菊不定芽增殖与生长表现很差。当食糖、蔗糖浓度相同时,太行菊不定芽增殖与生长状况差异较小,除在蔗糖培养基上的不定芽稍大外,对应糖浓度下的芽块大小、不定芽增殖系数等都相差不大。

综合分析,无论是使用蔗糖还是食糖,糖浓度过高(5%)将严重抑制太行菊不定芽的生长,引起不定芽生长停滞,分化数量减少;1.5%、3%糖浓度对太行菊不定芽的增殖与生长较适宜,特别是在1.5%糖浓度下不定芽生长更为旺盛,芽块中枯死叶片极少。在培养基中添加适宜浓度蔗糖的培养效果稍好于食糖,但差别并不大。

3 结论与讨论

有关太行菊离体培养的研究报道很少,在已有研究中,研究者一般采用MS培养基作为基本培养基。从理论上讲,MS培养基中无机盐浓度较高,微量元素及有机成分齐全而丰富,对多数植物的增殖培养而言,是较为理想的一种基本培养基。但太行菊生境土壤贫瘠,缺乏植物生长所需的营养,何种类型培养基更适合太行菊的离体培养,有必要进一步研究。

本研究以MS培养基(高无机盐培养基)为对照,研究B5、N6(高硝酸钾含量培养基,其中B5培养基有机物质含量高)和Nitsch(中等无机盐含量培养基,有机物质种类较全)3种基本培养基及其基本成分(大量元素、微量元素、有机物质)的不同搭配组合对太行菊离体培养的影响。

研究结果表明,太行菊不定芽在MS、B5、N6、Nitsch 4种基本培养基上的增殖与生长状况存在较大差异:在MS、N6基本培养基上,接种芽块均产生大量不定芽,并且不定芽生长基本正常,叶色鲜绿,芽块中黄化枯死的叶片都很少。不定芽在这2种培养基上生长的主要差异是N6培养基处理的不定芽较小,叶片窄短。在Nitsch、B5培养基上太行菊不定芽分化数量大幅度减少,增殖系数降低,且不定芽长势差,出现较多黄色至褐色的枯死不定芽。特别是在B5培养基上,芽块中不定芽枯死更严重,甚至整个芽块变褐枯死。B5、N6培养基都属于高无机盐含量、高KNO3含量培养基,按照本研究结果,不同培养基中微量元素与有机物质的构成差异对不定芽增殖与生长的影响较小,那么在这2种基本培养基上太行菊不定芽离体培养的差异应当是由于两者在大量元素组成上的差异引起。相对于N6、MS基本培养基,B5培养基的大量元素中CaCl2·2H2O用量显著降低,不含KH2PO4,硝态氮与铵态氮比例加大,是否由其中1种或多种因素以及其他因素造成太行菊离体培养差异,还须要进一步研究。

不同基本培养基大量元素、微量元素、有机成分的种类与含量各有特点,基本培养基之间基本成分的不同搭配组合,有望获得最适宜太行菊不定芽增殖与生长的基本培养基。与标准MS、B5、N6、Nitsch基本培养基相比,基于这4种基本培养基的4种组合培养基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅱ-7培养基)对太行菊不定芽增殖与生长有明显促进作用,太行菊在这些组合培养基上的离体培养效果均好于未改动的基本培养基。而由N6培养基大量元素与B5培养基微量元素、有机物质组合而成的Ⅱ-5培养基,在本研究中对太行菊离体培养的效果最好。

培养基中糖浓度对太行菊不定芽的增殖与生长有较大影响。糖浓度过高对太行菊不定芽的分化与生长产生抑制,在芽块表面往往形成大量颗粒状突起或芽点,而缺少伸长生长的不定芽。在一定范围内,适当降低培养基中糖浓度有利于不定芽的生长,减少枯死叶片的发生。在相同糖浓度下,在培养基中添加蔗糖的培养效果要稍好于食糖,但两者相差不大。食糖价格远低于蔗糖,若能用食糖替代蔗糖作为培养基碳源,将会大大降低离体培养中的生产成本。1.5%、3%食糖都可以用于太行菊不定芽的离体培养,3%食糖处理的太行菊不定芽增殖系数稍高,但1.5%食糖处理的不定芽长势更旺,芽块中枯叶更少。在兼顾太行菊不定芽增殖与生长的前提下,若进行太行菊组培苗的规模化生产,在培养基中添加1.5%食糖是较理想的选择。

参考文献:

[1]丁保章,王遂义. 河南植物志:第3册[M]. 郑州:河南科学技术出版社,1997:632.

[2]卢炯林,王磐基. 河南省珍稀濒危保护植物[M]. 开封:河南大学出版社,1990:197-199.

[3]刘 莹,孙跃枝,田转运. 太行菊的生物学特性及保护利用[J]. 湖北农业科学,2012,51(17):3775-3776.

[4]胡 枭,赵惠恩. 太行菊属与菊属亚菊属远缘杂交试验初报[J]. 现代农业科学,2008,15(6):13-14.

[5]李 健,陈发棣,陈素梅,等. 太行菊和芙蓉菊花粉母细胞减数分裂过程[J]. 南京农业大学学报,2009,32(4):43-46.

[6]高亚卉,戴攀峰,姬志峰,等. 太行菊属植物花粉形态研究[J]. 西北植物学报,2011,31(12):2464-2472.

[7]何敏杰,程月琴,王红卫,等. 太行菊DNA提取和ISSR标记的筛选与优化[J]. 中国农学通报,2012,28(16):202-207.

[8]桑叶子,孙 明,张启翔. 太行菊细胞悬浮培养体系的建立[J]. 河南农业大学学报,2011,45(2):177-182.

[9]姚连芳,董美华,毛玉收.太行菊组织培养研究[J]. 中国农学通报,2004,20(6):29-31.

[10]王建博,徐思明,董 鹏,等. 太行菊顶芽离体高效再生系的建立[J]. 首都师范大学学报:自然科学版,2008,29(5):45-50.

[11]沈世华,陆文梁,王伏雄. 太行花生殖生物学研究:太行花生境的分析[J]. 生物多样性,1994,2(4):210-212.