邹贤刚 ，付书婕 ，黄兴振，巫玲玲，蒋伟哲

（1．北海蓝海洋生物药业有限责任公司，广西 北海 536000； 2．广西医科大学药学院，广西 南宁 530021）

血脂异常是心血管疾病的重要危险因素，高脂血症的流行病学调查表明，我国血脂异常总患病率为18．6%[1]。高血脂是引起动脉粥样硬化（AS）性疾病和脂肪肝的主要因素，与之相关的心脑血管疾病发病率高、危害大、病情进展凶险，死亡率约占人类总死亡率的50%[2]。目前，调血脂的西药不良反应多，且价格较贵，故从中草药中寻找有效的调血脂药一直备受关注。牡蛎降脂胶囊由牡蛎肉、大黄、麦冬、西洋参等组方。牡蛎肉是广西北海特色海洋产品，属药食两用药材，可促进血液循环，促进脂代谢。大黄具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经的功效，常用于调血脂，可降低总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白及过氧化脂质的水平。麦冬甘寒清润，可提高免疫功能、养阴生津、润肺清心。西洋参可补气养阴、清热生津，可促进糖代谢和脂肪代谢。该方在民间已有临床应用，但并无现代药理学理论的支撑，因此对其进行系统的药理作用研究，阐明其药理作用及机制，可为其深入开发与应用提供理论基础。本试验中以高脂饲料喂养鹌鹑建立动物病理模型，观察牡蛎降脂胶囊对高脂血症模型鹌鹑血脂水平及脂代谢相关酶的影响，为其开发及临床应用提供依据。

1 材料与方法

1．1 仪器、试药与动物

7170型全自动生化分析仪（日本日立公司）；XHF-D高速分散器（宁波新芝生物科技股份有限公司）；AW220型电子天平（日本岛津公司）；722型分光光度计（上海第三分析仪器厂）；AllegraX-12型离心机（美国贝克曼库尔特有限公司）；Sunrise-BASIC酶标仪（瑞士 Tecan公司）。牡蛎降脂胶囊（北海蓝海洋生物药业有限责任公司，批号为20110425，规格为每粒0．35 g，人推荐用量2．1 g／d）；月见草油胶丸（武汉中联集团四药药业有限责任公司，批号为20110309，规格为每粒0．3 g）。血清 TC检测试剂盒（批号为091081）、血清 TG检测试剂盒（批号为090815）、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)检测试剂盒（批号为090512）、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测试剂盒（批号为090916）、总酯酶检测试剂盒，均购于南京建成生物工程研究所；载脂蛋白AI(Apo AI)检测试剂盒（批号为 100821）、载脂蛋白(Apo B)检测试剂盒（批号为100922），均购于中生北控生物科技股份有限公司；游离胆固醇（FC）测定试剂盒（Sigma公司，批号为110823）。普通饲料购于南宁饲料厂；高脂饲料配方参考AIN-93G国际配方，普通饲料 78．8%、胆固醇 1%、胆盐 0．2%，熟猪油10%、蛋黄粉10%，充分搅拌至均匀。体重60～100 g的鹌鹑，约4周龄，雌雄各半（广西医科大学实验动物中心提供，SPF级，合格证号为SCXKG（桂）2009-0002）。

1．2 方法

动物分组与给药[3]：取鹌鹑72只，以普通饲料适应性喂养7 d后，测定血脂、脂蛋白水平，按体重并参考TG，TC水平随机分为6组，每组12只，即对照组(A组)，模型组(B组)，月见草油胶丸组（阳性对照组，C 组），牡蛎降脂胶囊低、中、高剂量组（D1，D2，D3组，剂量分别为 0．3，0．6，1．2 g ／kg，分别为人体推荐用量的 10，20，40倍）。对照组喂饲普通饲料，其余各组喂饲高脂饲料连续10周，高脂造模成功。各给药组自造模第11周开始给予药物治疗，每日1次，A组及B组灌胃给予蒸馏水6 mL／kg；C组灌胃给予月见草油 0．26 g／kg（人体推荐用量的 20倍）；牡蛎降脂胶囊各组分别按剂量灌胃给药，模型组及给药组同时继续喂饲高脂饲料，连续6周。动物房温度为（22±2）℃，相对湿度为65%。

指标检测：每周称鹌鹑体重1次，观察体重变化趋势。试验结束后，停止给予高脂饲料，普通饲料喂养3 d，所有鹌鹑禁食12 h，以减少高脂饲料中胆固醇对试验结果的影响，断头取血置离心管中，加盖置4℃冰箱30 min后取出，以3 000 r／min的速率离心20 min，分离出上层血清即为待测样品。测定血清中 TC，TG，HDL-C，LDL-C，Apo AI，Apo B、肝脂酶（HL）和脂蛋白脂酶（LPL）水平。血清中卵磷酯胆固醇的转移酶（LCAT）的测定，参照蒋宪成等[4]的方法，在500 nm波长处测定游离型胆固醇（FC）水平，以FC的减少量（即胆固醇酯化量）表示LCAT活性大小。

统计学处理：采用 SPSS 13．0统计软件，所得数据用±s表示，计量资料进行单因素方差分析，计数资料的比较采用 χ2检验。P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

试验过程中，各组鹌鹑的毛发有光泽、行动灵活，食量及大便正常。在造模的前4周，鹌鹑体重的增长速度较快，第5周开始体重增长变慢。在整个试验期间，对照组的体重增长速度相对于模型组及牡蛎降脂胶囊各剂量组较缓慢，但到14周后体重基本相近。牡蛎降脂胶囊对高脂血症鹌鹑体重及各指标的影响见表1至表 3。

3 讨论

长期食用高胆固醇食物，容易引起高TG及TC血症。HDLC和LDL-C代谢异常，相应地表现出Apo AI和Apo B的代谢异常。Apo AI是 HDL-C最主要的蛋白成分，在血浆中的浓度与HDL-C的水平相关，是脂代谢关键酶LCAT的激活剂，而LCAT在胆固醇的逆向转运中起主要作用；Apo AI水平升高就可激活LCAT，加强胆固醇的逆向转运，从而降低胆固醇水平[5]。Apo B是LDL-C的主要载脂蛋白，在运输内源性胆固醇、TG和LDL-C的代谢中起主要作用，携带的胆固醇在动脉壁沉积，会导致动脉粥样硬化的发生[6]。

表1 牡蛎降脂胶囊对高脂血症鹌鹑体重的影响（±s，g，n＝12）

表1 牡蛎降脂胶囊对高脂血症鹌鹑体重的影响（±s，g，n＝12）

注：与 A 组比较， P ＜0．05， P ＜0．01；与 B 组比较， P ＜0．05，P ＜ 0．01。下表同。

组别A组B组C组D1组D2组D3组试验前81．4 ±5．5 81．9 ±6．6 82．1 ±6．9 82．2 ±5．3 83．1 ±6．5 83．3 ±5．7 4周107．7 ± 3．5 124．1 ± 3．6 122．8 ± 2．5 122．1 ± 2．2 123．2 ± 3．5 122．4 ± 3．1 10周141．1 ± 2．7 161．7 ± 3．8 159．2 ± 7．1 161．3 ± 7．3 160．2 ± 6．5 161．2 ± 7．0 12周161．9 ±6．8 170．6 ±8．8 167．7 ±6．9 171．2 ±7．5 169．5 ±6．4 169．6 ±5．0 14周181．7 ± 4．0 190．6 ± 2．8 179．3 ± 3．1 184．8 ± 5．5 182．3 ± 4．1 181．6 ± 2．8 16周191．0 ± 7．1 209．3 ± 5．1 195．2 ± 5．6 192．1 ± 6．1 193．7 ± 4．1 190．5 ± 6．5

表2 牡蛎降脂胶囊对高脂血症鹌鹑血脂的影响（±s，mmol／L，n＝12）

表2 牡蛎降脂胶囊对高脂血症鹌鹑血脂的影响（±s，mmol／L，n＝12）

组别A组B组C组D1组D2组D3组TG 0．73 ± 0．20 1．25 ± 0．19 0．83 ± 0．20 0．93 ± 0．21 0．75 ± 0．18 0．80 ± 0．26 TC 2．18 ± 2．5 3．47 ± 0．31 2．37 ± 0．27 2．82 ± 0．23 2．43 ± 0．26 2．31 ± 0．27 HDL-C 0．79 ± 0．18 0．71 ± 0．15 0．77 ± 0．23 0．73 ± 0．20 0．75 ± 0．19 0．74 ± 0．21 LDL-C 1．24 ± 0．15 2．28 ± 0．17 1．50 ± 0．19 2．00 ± 0．13 1．58 ± 0．14 1．70 ± 0．18

表3 牡蛎降脂胶囊对高脂血症鹌鹑血清中载脂蛋白和血清中LCAT，HL，LPL 的影响（±s，n＝12）

表3 牡蛎降脂胶囊对高脂血症鹌鹑血清中载脂蛋白和血清中LCAT，HL，LPL 的影响（±s，n＝12）

载脂蛋白（mmol／L）组别A组B组C组D1组D2组D3组Apo AI 0．110 ± 0．014 0．057 ±0．013 0．080 ± 0．010 0．073 ±0．010 0．075 ± 0．019 0．084 ± 0．035 Apo B 0．226 ± 0．032 0．422 ±0．033 0．259 ± 0．035 0．249 ±0．041 0．237 ± 0．048 0．225 ± 0．024 LCAT（ mol／L）1．74 ± 0．12 0．86 ± 0．08 1．63 ± 0．11 1．35 ± 0．09 1．64 ± 0．18 1．71 ± 0．16 HL（ mol／L）17．12 ± 1．06 8．58 ± 0．18 17．09 ± 0．77 14．46 ± 0．98 16．15 ± 1．45 16．94 ± 0．78 LPL（ mol／L）47．27 ± 1．52 23．50 ± 1．26 47．04 ± 1．17 41．83 ± 0．97 45．37 ± 1．12 47．00 ± 1．31

在血浆脂蛋白代谢过程中，许多脂酶起着重要作用，主要包括LPL，HL，LCAT。血浆中 TG的增高或降低与血浆中 LPL的活性有一定关系，LPL具有水解脂蛋白中TG为非酯化脂肪酸（NEFA）和甘油的作用。因此，LPL是影响血浆中TG的一个直接因素。HL活力异常会引起血浆脂蛋白代谢紊乱。LCAT在血浆胆固醇酯化及HDL-C的成熟过程中起着重要作用。HDL-C与肝细胞膜的HDL-C受体结合，被肝细胞摄取，在此过程中胆固醇被用于合成胆汁酸或通过胆汁排出体外，使胆固醇在肝的代谢中被清除[7]，LCAT活性决定 HDL-C的生成。因此，脂代谢酶的活性与血脂水平紧密相关，苏慧等[8]的研究也表明，LCAT，HL，LPL都是调节脂蛋白代谢的关键酶，在脂代谢中发挥重要作用。

建立合适的高脂血症动物模型是推进高脂血症研究进程的关键。目前常用于高脂血症模型且价格经济的动物有大鼠、家兔和鹌鹑。大鼠血清中HDL-C是血胆固醇的主要载体，但大鼠具有对抗动脉粥样硬化形成的能力。家兔是最早用于制造高脂血症模型的动物，其对高脂饲料敏感性高，外源性胆固醇的吸收率高，但家兔为食草动物，胆固醇代谢与人类差异较大，病变与人体不同，且抵抗力差，容易继发感染而死亡。目前，鹌鹑被作为高脂血症及AS模型常用动物，为脊椎动物中能自发形成AS的易感动物之一，且来源充足，饲养方便，食料简单。

本研究中采用高脂饲料喂饲鹌鹑复制高脂血症模型，研究牡蛎降脂胶囊对鹌鹑血脂、脂蛋白、载脂蛋白及脂代谢酶的影响，旨在探索牡蛎降脂胶囊调节血脂代谢的作用机制。结果表明，牡蛎降脂胶囊可以显著降低高血脂症鹌鹑血清中的TG，TC，LDL-C水平，但对血清中HDL-C的升高作用不明显。同时，牡蛎降脂胶囊通过提高 Apo AI含量，降低 Apo B含量，提高 LCAT，HL，LPL的活性，而发挥调血脂的作用。结果提示，牡蛎降脂胶囊可有效控制血脂水平，特别是高脂膳食引起的高脂血症，其调血脂的机制可能是通过激活载脂蛋白及脂代谢酶的活性，以抑制肠道内外源性血脂和脂蛋白的吸收，加速胆固醇的代谢和促进胆固醇的排泄来调节TC代谢。

控制高血脂对于治疗AS是非常重要的途径，目前国内外治疗AS应用最多的是他汀类药物，但临床发现，长期服用这些化学调脂药物可发生多种不良反应，如对肝、肾功能有一定损害作用，严重时可危及生命；此外还具有用药渐强、停药渐升的弊端[9]。天然中草药防治高脂血症及抗AS的研究工作日益受到国内外医学界的重视，大量药理研究及临床报道也已证明中草药具有一定的调脂和抗AS作用，且不良反应少[10]。综上所述，牡蛎降脂胶囊在高脂血症及AS的防治中具有较好的应用前景，值得进一步深入研究开发并加以利用。

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