王东升等

甘肃省新兽药工程重点实验室，甘肃兰州 730050；2.甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070）

摘要：为了研究大肠杆菌感染对猪血液生化指标的影响，将16头1月龄的仔猪随机分为对照组和试验组，分别肌内注射0.045 mL/kg生理盐水和4.5亿CFU/kg大肠杆菌，并于接种后第24小时从猪前腔静脉采血，分离血清，用全自动生化分析仪测定血清生化指标。结果可以看出，与对照组猪相比，试验组猪血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量显著升高（P<0.05），CREA极显著升高（P<0.01），而ALB含量和A/G极显著降低（P<0.01），钙含量、LT/ST和钙/磷的值显著减小（P<0.05）。说明大肠杆菌感染可引起猪肝、肾和心功能的异常。

关键词：猪；大肠杆菌；血液生化指标

中图分类号： S858.285.1+2 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）04-0172-03

收稿日期：2013-08-23

基金项目：国家科技支撑计划（编号：2008BADB4B01-2）。

作者简介：王东升（1979—），男，甘肃临洮人，硕士，助理研究员，主要从事中药药理与奶牛疾病的研究。E-mail：lzmyswds@126.com。

通信作者：严作廷，博士，研究员。E-mail：yanzuoting@caas.cn。仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的仔猪肠道感染的传染性疾病，由发病日龄和临床症状的差异可将该病分为仔猪黄痢、仔猪白痢和猪水肿病3种，以发生肠炎、肠毒血症为特征[1]。这些疾病在世界各地均有发生，常常造成新生仔猪的大批死亡或生长发育不良，从而严重阻碍养猪业的发展。目前对大肠杆菌C83-1的研究主要集中在体外抑菌[2]、药物对其杀灭作用[3]及疫苗开发研究[4]等方面，但尚未见关于该菌感染后猪血液生化指标变化的报道。血液通过在机体的循环参与机体营养物质和氧气的运输，从而将代谢废物转运至排泄器官或移除，此外还参与抵抗细菌、病毒等病原微生物的感染等多种功能活动，对维持动物机体的正常新陈代谢发挥重要作用。血液生化指标是动物机体新陈代谢过程的内在反映，也是研究动物病理学、生理学、毒理学和探讨疾病发病机理的重要参考指标，可以作为判断动物机体健康状况的重要依据[5]。因此通过研究大肠杆菌感染后猪血液相关生化指标的变化，可以为临床诊断和治疗该病提供理论依据。

1材料与方法

1.1试验菌种

大肠杆菌C83-1，购自中国兽医药品监察所。攻毒前接种于普通肉汤管中，37 ℃ 下培养18～20 h后镜检，纯粹后吸取0.5 mL接种于营养琼脂平板上，使平板全部浸润后置于37 ℃培养20 h；用生理盐水将菌苔洗下，将洗下的菌液混合后进行平板计数，结果浓度为100亿CFU/mL；将菌液置于 4 ℃ 保存过夜。

1.2试验动物分组与处理

选择健康状况良好、日龄相近的16头杂交猪，体重 8.0～10.0 kg，雌、雄兼有，均购自兰州市某养猪场。随机均分为对照组和试验组，于对照组肌内注射0.045 mL/kg生理盐水，试验组肌内注射4.5亿CFU/kg体重的大肠杆菌。在接种后第24小时从猪前腔静脉采10～15 mL血，分离血清并于-80 ℃保存。

1.3生化指标测定

用迈瑞BS-420全自动生化分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）测定血清生化指标，主要包括天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、γ-谷氨酸转肽酶（γ-GT）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、总胆固醇（TC）、总血红素（TBiL）、直接血红素（DBiL）、肌酐（CREA）、尿素（UREA）、尿酸（UA）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、血糖（GLU）、钙（Ca）、磷（P）和镁（Mg）等19项生化指标。计算ALB与GLB的比值（A/G）、ALT与AST的比值（LT/ST）、钙磷比（钙/磷）。试验所用试剂盒均为深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司的产品。

1.4数据处理

试验数据以“平均数±标准差”表示，采用SPSS 17.0软件进行统计分析，组间数据差异性比较采用独立样本t检验。

2结果与分析

大肠杆菌感染对猪血液生化指标的影响见表1。其中AST、γ-GT、ALP、GLB、ALB、A/G、LT/ST、TC、TBiL、DBiL、ALT、TP、GLU为肝功能相关指标，CREA、UREA、UA为肾功能相关指标，血清钙含量、钙/磷比、血清磷含量、血清镁含量为血清离子的变化指标，LDH、CK为心功能相关指标。

2.1肝功能相关指标的变化

3结论与讨论

肝脏是动物机体中含酶最丰富的器官，其酶含量约占肝脏总蛋白含量的2/3。血液中的ALT与AST是动物体内2种重要的转氨酶，是反映动物肝脏功能的重要指标[6]。当肝组织发生病变或受到损伤后，肝细胞内的ALT、AST释放入血浆，致使血清中的ALT、AST酶活性增强，但其增强幅度不一定与肝细胞的损伤程度成正比[7-8]。表现为在轻、中度肝细胞损害时，ALT漏出率大于AST；在重度肝细胞损害时线粒体遭到破坏，AST漏出增加[9]，因此医学上常将ALT、AST作为诊断肝脏疾病的酶学指标。血清中的γ-GT主要来自肝脏，因此具有较强的特异性，当肝胆系统有疾病时，γ-GT升高，因此常以此酶作为病畜能否恢复到正常状态的标志[10]。当动物肝脏发生疾病时，肝细胞过度产生ALP，并经淋巴管和肝窦进入血液，同时由于肝内胆管胆汁排泄障碍，过度的ALP反流入血液而引起血清ALP明显升高。本试验中，与对照组相比，试验组AST、γ-GT、ALP均显著升高，LT/ST显著降低，说明大肠杆菌可以引起猪的肝损伤、肝细胞膜通透性增加，进而引起肝细胞中AST释放入血液中，γ-GT和过度产生的ALP也进入血液中，进而导致血清中AST、γ-GT、ALP升高。endprint

肝脏参与蛋白质的合成与分解代谢，血清TP含量和ALB含量是反映肝功能的重要指标，ALB由肝脏产生，是血浆蛋白的主要组成成分，在血液胶体渗透压维持和体内代谢物质转运及营养等方面发挥重要作用，当肝功能受损时，ALB的分泌减少[11]。GLB与机体免疫功能密切相关，当机体发生应激反应及各种原因造成的肝损伤时，ALB含量降低，GLB含量升高[12-13]。本试验中试验组GLB显著高于对照组，而ALB、A/G显著低于对照组，说明大肠杆菌可以引起猪肝脏对蛋白质代谢功能异常，这可能与猪感染大肠杆菌后，肝细胞功能受损、合成ALB减少，但由于大肠杆菌刺激机体的免疫系统而产生的免疫球蛋白增多有关。

肾脏是动物的主要泌尿器官和排泄器官，血液中的UREA来源于肝脏，而去路是通过肾脏随尿排出。当肾实质受损时，肾小球滤过率下降，滤过增多，导致血液中UREA浓度升高。UA主要产生于肝脏，在肾脏中与白蛋白结合，大部分被肾小管重吸收并转变为尿囊素随尿排出，肾脏严重损伤时，血液中的UA升高。CREA为体内物质代谢过程的中间产物，当肾实质损害、肾小球滤过率降低到临界点后，血中的CREA浓度就会急剧上升，但是由于肾脏的储备力和代偿力很大，因此在肾小球受损的早期或轻度损害时，血液中的CREA浓度可能是正常的，但当血液中的CREA含量明显增高时，常表现出肾脏功能严重受损[14]。本试验中试验组CREA极显著升高，UA有上升趋势，UREA无显著异常，说明猪感染大肠杆菌可引起肾功能异常。

体液的主要成分是水和电解质，电解质在维持体液渗透压和细胞内外的水及酸碱平衡中发挥着重要作用。机体主要通过肾脏维持体液的平衡和保持内环境稳定，肾功能异常时体液中的离子发生变化。钙是动物机体中含量最多的常量金属元素，严重的全身感染性疾病可引起低钙血症，而且病情越严重，血钙水平越低[15]，肾病综合征可引起血钙水平降低[16]。肾脏发生疾病时，对磷的排泄功能下降，可引起血液磷的浓度升高。本试验中试验组血清钙含量和钙/磷降低，血清磷含量显著升高，这表明大肠杆菌感染可引起猪的钙、磷代谢紊乱，这可能肾功能异常有关。

血清中的CK和LDH是肌细胞损伤的重要指标，临床上常用于心肌损害的辅助诊断。LDH活性可反映细胞内无氧酵解的活跃程度，在一定程度上能够反映机体的应激能力[17]。AST在一定程度上也可反映心肌细胞的损伤。本试验中，与对照组相比，试验组LDH显著升高，表明猪感染大肠杆菌后，心肌细胞膜通透性增加，造成LDH的泄漏；而AST升高，LT/ST显著减小，表明感染引起心肌细胞受损严重，这可能与大肠杆菌感染导致猪呼吸困难而导致的机体缺氧、心脏代偿功能增强有关。

本试验采用肌内注射大肠杆菌C83-1感染猪，通过对猪血清生化指标变化的分析，研究了大肠杆菌感染对猪肝、肾和心功能的影响。试验结果表明，大肠杆菌感染可使猪血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量显著升高（P<0.05），CREA极显著升高（P<0.01），而ALB含量和A/G极显著降低（P<0.01），钙含量、LT/ST和钙/磷的值显著降低（P<005）。这说明大肠杆菌感染可引起猪肝、肾和心功能的异常。

参考文献：

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[7]冷静，朱仁俊，马黎.日粮锌水平对断奶仔猪血清酶学指标的影响[J]. 中国饲料，2004（10）：15-16.

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[9]张铮铮，邝卫红，吴树铎. 肝硬化不同证型与ALT、AST、TB、IB、TBA的相关性研究[J]. 河南中医学院学报，2009，24（1）：63-64.

[10]张金枝，刘建新，华卫东，等. 大蒜对断奶仔猪生产性能和血液生化指标的影响[J]. 中国畜牧杂志，2005，41（10）：35-37.

[11]耿忠诚，袁子国，刘丽丽，等. 三江白猪Hal基因型及其血液生化指标的测定[J]. 中国兽医科技，2005，35（10）：794-797.

[12]陈琼，廖三赛，贺长青，等. 抗仔猪断奶应激剂对断奶仔猪血清生化指标及血常规的影响[J]. 广西畜牧兽医，2008，24（3）：136-139.

[13]闫广运. 不同肝脏疾病检测指标的特征性变化特点与分析[J]. 医学信息：下旬刊，2010，23（10）：115-116.

[14]焦库华，马建云，袁燕，等. 不同剂量氟苯尼考对猪血液生化指标及猪瘟抗体的影响[J]. 中国兽医学报，2009，29（12）：1586-1589.

[15]Sankaran R T，Mattana J，Pollack S，et al. Laboratory abnormalities in patients with bacterial pneumonia[J]. CHEST，1997，111（3）：595-600.

[16]伍晓雄. 猪β-连环素基因的分离，多态性检测及其与生产性状、生理生化指标的关联分析[D]. 武汉：华中农业大学，2008.

[17]信富钰，侯明海，李文立，等. 不同锌水平对荷斯坦种公牛血液理化指标的影响[J]. 动物营养学报，2007，19（5）：627-630.endprint

肝脏参与蛋白质的合成与分解代谢，血清TP含量和ALB含量是反映肝功能的重要指标，ALB由肝脏产生，是血浆蛋白的主要组成成分，在血液胶体渗透压维持和体内代谢物质转运及营养等方面发挥重要作用，当肝功能受损时，ALB的分泌减少[11]。GLB与机体免疫功能密切相关，当机体发生应激反应及各种原因造成的肝损伤时，ALB含量降低，GLB含量升高[12-13]。本试验中试验组GLB显著高于对照组，而ALB、A/G显著低于对照组，说明大肠杆菌可以引起猪肝脏对蛋白质代谢功能异常，这可能与猪感染大肠杆菌后，肝细胞功能受损、合成ALB减少，但由于大肠杆菌刺激机体的免疫系统而产生的免疫球蛋白增多有关。

肾脏是动物的主要泌尿器官和排泄器官，血液中的UREA来源于肝脏，而去路是通过肾脏随尿排出。当肾实质受损时，肾小球滤过率下降，滤过增多，导致血液中UREA浓度升高。UA主要产生于肝脏，在肾脏中与白蛋白结合，大部分被肾小管重吸收并转变为尿囊素随尿排出，肾脏严重损伤时，血液中的UA升高。CREA为体内物质代谢过程的中间产物，当肾实质损害、肾小球滤过率降低到临界点后，血中的CREA浓度就会急剧上升，但是由于肾脏的储备力和代偿力很大，因此在肾小球受损的早期或轻度损害时，血液中的CREA浓度可能是正常的，但当血液中的CREA含量明显增高时，常表现出肾脏功能严重受损[14]。本试验中试验组CREA极显著升高，UA有上升趋势，UREA无显著异常，说明猪感染大肠杆菌可引起肾功能异常。

体液的主要成分是水和电解质，电解质在维持体液渗透压和细胞内外的水及酸碱平衡中发挥着重要作用。机体主要通过肾脏维持体液的平衡和保持内环境稳定，肾功能异常时体液中的离子发生变化。钙是动物机体中含量最多的常量金属元素，严重的全身感染性疾病可引起低钙血症，而且病情越严重，血钙水平越低[15]，肾病综合征可引起血钙水平降低[16]。肾脏发生疾病时，对磷的排泄功能下降，可引起血液磷的浓度升高。本试验中试验组血清钙含量和钙/磷降低，血清磷含量显著升高，这表明大肠杆菌感染可引起猪的钙、磷代谢紊乱，这可能肾功能异常有关。

血清中的CK和LDH是肌细胞损伤的重要指标，临床上常用于心肌损害的辅助诊断。LDH活性可反映细胞内无氧酵解的活跃程度，在一定程度上能够反映机体的应激能力[17]。AST在一定程度上也可反映心肌细胞的损伤。本试验中，与对照组相比，试验组LDH显著升高，表明猪感染大肠杆菌后，心肌细胞膜通透性增加，造成LDH的泄漏；而AST升高，LT/ST显著减小，表明感染引起心肌细胞受损严重，这可能与大肠杆菌感染导致猪呼吸困难而导致的机体缺氧、心脏代偿功能增强有关。

本试验采用肌内注射大肠杆菌C83-1感染猪，通过对猪血清生化指标变化的分析，研究了大肠杆菌感染对猪肝、肾和心功能的影响。试验结果表明，大肠杆菌感染可使猪血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量显著升高（P<0.05），CREA极显著升高（P<0.01），而ALB含量和A/G极显著降低（P<0.01），钙含量、LT/ST和钙/磷的值显著降低（P<005）。这说明大肠杆菌感染可引起猪肝、肾和心功能的异常。

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[14]焦库华，马建云，袁燕，等. 不同剂量氟苯尼考对猪血液生化指标及猪瘟抗体的影响[J]. 中国兽医学报，2009，29（12）：1586-1589.

[15]Sankaran R T，Mattana J，Pollack S，et al. Laboratory abnormalities in patients with bacterial pneumonia[J]. CHEST，1997，111（3）：595-600.

[16]伍晓雄. 猪β-连环素基因的分离，多态性检测及其与生产性状、生理生化指标的关联分析[D]. 武汉：华中农业大学，2008.

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肝脏参与蛋白质的合成与分解代谢，血清TP含量和ALB含量是反映肝功能的重要指标，ALB由肝脏产生，是血浆蛋白的主要组成成分，在血液胶体渗透压维持和体内代谢物质转运及营养等方面发挥重要作用，当肝功能受损时，ALB的分泌减少[11]。GLB与机体免疫功能密切相关，当机体发生应激反应及各种原因造成的肝损伤时，ALB含量降低，GLB含量升高[12-13]。本试验中试验组GLB显著高于对照组，而ALB、A/G显著低于对照组，说明大肠杆菌可以引起猪肝脏对蛋白质代谢功能异常，这可能与猪感染大肠杆菌后，肝细胞功能受损、合成ALB减少，但由于大肠杆菌刺激机体的免疫系统而产生的免疫球蛋白增多有关。

肾脏是动物的主要泌尿器官和排泄器官，血液中的UREA来源于肝脏，而去路是通过肾脏随尿排出。当肾实质受损时，肾小球滤过率下降，滤过增多，导致血液中UREA浓度升高。UA主要产生于肝脏，在肾脏中与白蛋白结合，大部分被肾小管重吸收并转变为尿囊素随尿排出，肾脏严重损伤时，血液中的UA升高。CREA为体内物质代谢过程的中间产物，当肾实质损害、肾小球滤过率降低到临界点后，血中的CREA浓度就会急剧上升，但是由于肾脏的储备力和代偿力很大，因此在肾小球受损的早期或轻度损害时，血液中的CREA浓度可能是正常的，但当血液中的CREA含量明显增高时，常表现出肾脏功能严重受损[14]。本试验中试验组CREA极显著升高，UA有上升趋势，UREA无显著异常，说明猪感染大肠杆菌可引起肾功能异常。

体液的主要成分是水和电解质，电解质在维持体液渗透压和细胞内外的水及酸碱平衡中发挥着重要作用。机体主要通过肾脏维持体液的平衡和保持内环境稳定，肾功能异常时体液中的离子发生变化。钙是动物机体中含量最多的常量金属元素，严重的全身感染性疾病可引起低钙血症，而且病情越严重，血钙水平越低[15]，肾病综合征可引起血钙水平降低[16]。肾脏发生疾病时，对磷的排泄功能下降，可引起血液磷的浓度升高。本试验中试验组血清钙含量和钙/磷降低，血清磷含量显著升高，这表明大肠杆菌感染可引起猪的钙、磷代谢紊乱，这可能肾功能异常有关。

血清中的CK和LDH是肌细胞损伤的重要指标，临床上常用于心肌损害的辅助诊断。LDH活性可反映细胞内无氧酵解的活跃程度，在一定程度上能够反映机体的应激能力[17]。AST在一定程度上也可反映心肌细胞的损伤。本试验中，与对照组相比，试验组LDH显著升高，表明猪感染大肠杆菌后，心肌细胞膜通透性增加，造成LDH的泄漏；而AST升高，LT/ST显著减小，表明感染引起心肌细胞受损严重，这可能与大肠杆菌感染导致猪呼吸困难而导致的机体缺氧、心脏代偿功能增强有关。

本试验采用肌内注射大肠杆菌C83-1感染猪，通过对猪血清生化指标变化的分析，研究了大肠杆菌感染对猪肝、肾和心功能的影响。试验结果表明，大肠杆菌感染可使猪血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量显著升高（P<0.05），CREA极显著升高（P<0.01），而ALB含量和A/G极显著降低（P<0.01），钙含量、LT/ST和钙/磷的值显著降低（P<005）。这说明大肠杆菌感染可引起猪肝、肾和心功能的异常。

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[15]Sankaran R T，Mattana J，Pollack S，et al. Laboratory abnormalities in patients with bacterial pneumonia[J]. CHEST，1997，111（3）：595-600.

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