李 晓，孟秀秀，代月婷，黎 倩，黄 兵，胡 欣

(吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心，吉林 长春 130118)

〈育种与驯化〉

黑木耳简单快速组织分离新法*

李 晓，孟秀秀，代月婷，黎 倩，黄 兵，胡 欣

(吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心，吉林 长春 130118)

利用酒精、镊子对黑木耳耳片进行组织分离，方法方便、快捷，分离成功率100%。

黑木耳；干耳片；组织分离

从早期的耳木分离法、孢子弹射分离法培育菌种发展到后来的利用鲜木耳或干耳片分离法[1]培育菌种，木耳菌种的选育工作一直比较繁琐且分离成活率不高。为突破这一难关，笔者经实践，探索出了1种木耳干耳组织分离新技术。此法不仅目标明确、盲目性低，而且兼具取材简单、操作便捷、成活率高等诸多优势。经此法分离培育的菌株菌丝萌发迅速，生长旺盛，浓白粗壮。

1 材料与方法

1.1 分离材料

挑选少筋、无褶皱或少褶皱、无霉、无虫害、6分～8分成熟度的吉Au01单片为实验材料。

1.2 分离工具

镊子、酒精灯、打火机、90 mm培养皿(4个)、75%消毒酒精棉、超净工作台。

1.3 分离培养基

采用常规PDA培养基。其配方为马铃薯(去皮，无芽)200 g、葡萄糖20 g、琼脂粉15 g～18 g(或琼脂条20 g)，水 1 000 mL。培养基在121℃下灭菌30 min后，待温度降至55℃～60℃时出锅摆斜面备用。

1.4 灭菌试剂

将4个培养皿依次编号为1、2、3、4，并分别对4个培养皿按表1进行处理。

表1 灭菌试剂处理

1.5 分离与培养

1.5.1 组织分离

首先，紫外线灭菌。将PDA试管培养基、培养皿等用具放置于超净工作台上，紫外线下灭菌30 min，以杀死大部分杂菌。

然后用75%的酒精棉球擦拭双手及镊子。……