卫文强,邢伟伟,于运运,朱欣茹,房 娜,王风玲,季少平

(河南大学医学院,河南开封475004)

一株耐盐葡萄球菌的分离与鉴定

卫文强,邢伟伟,于运运,朱欣茹,房 娜,王风玲,季少平*

(河南大学医学院,河南开封475004)

目的 从盐碱地土壤中分离耐盐耐药细菌。方法 采用倍比稀释法从土壤中分离不同性状的细菌,分别对这些细菌进行耐盐性实验,将筛选到耐150 g/L NaCl的菌株进行生化实验、药敏实验和16sRNA序列分析。结果16sRNA分析表明从土壤中分离到一株耐盐表皮葡萄球菌,能分解乳糖和蔗糖,可在150 g/L NaCl中生长,该菌株对青霉素和苯唑西林耐药。结论 该耐盐葡萄球菌株的分离将为耐盐基因的克隆及转基因耐盐菌株的应用奠定基础。

葡萄球菌;耐盐;16sRNA;鉴定

医药、化工等领域高盐废水的排放,给环境带来一定的污染,耐盐细菌在高盐废水的治理方面能发挥积极的作用。开封地区地处豫东大平原,属于盐碱土壤[1]。为了挖掘该地区的耐盐微生物资源,我们从土壤中分离菌株,筛选到一株耐盐表皮葡萄球菌,并对其生理特性进行了分析。我们的研究将为耐盐基因的克隆和转基因耐盐菌株的应用奠定基础。

1 材料和方法

1.1 材料

普通肉汤培养基(北京奥博星生物公司);抗生素药敏纸片及含糖生化培养基(杭州天和微生物试剂公司);Taq酶(日本Ta KaRa公司);MarkerⅢ(上海莱枫生物公司)。

1.2 土壤菌群的分离

土样取自河南大学金明校区校园附近,用无菌蒸馏水将土样倍比稀释。用移液器分别吸取10-2、10-3、10-43个梯度的菌液各0.1 m L,用无菌三角涂棒均匀涂布在肉汤琼脂固体培养基表面,置37℃的恒温培养箱中培养24 h,观察菌落的生成情况。……