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胃饲乙醇预处理对缺血再灌注大鼠肝脏HSP70表达和缺血再灌注损伤的影响*

2014-06-13张晓宁

关键词:实验模型

张晓宁 张 劭

(南华大学附属第一医院,湖南 衡阳 421001)

肝脏缺血再灌注损伤是肝胆外科常见病理损伤,于肝脏相关手术中,因长时间部分或全阻断肝血流供应,致肝脏缺血再灌注,可能致肝细胞损伤与代谢紊乱,不仅影响手术安全还可能影响治疗与康复效果,因此探究缺血预处理方法(ischemia preconditioning,IPC)保护干细胞组织,抑制缺血再灌注损伤非常必要。本次研究以大鼠为实验对象,建立肝脏缺血再灌注损伤模型,以胃饲乙醇IPC,探讨其应用价值。

1 资料及方法

1.1 实验材料

购清洁级雄性大鼠150只,体重280~300 g,选用HSP70 SABC免疫生化试剂盒等试剂。

1.2 方 法

恒温喂养,标准养殖,以随机数字表达法分为实验组50只、实验对照组50只、正常组50只。胃饲乙醇IPC方法,于手术前12 h禁食,给予胃饲40%乙醇5.05 ml/kg体重后于24 h后将实验组与实验对照组分别制备肝脏缺血再灌注模型,缺血时间30 min。实验组建立模型后分别选模型大鼠10只于0、2、4、8、12h处死,于手术台上取肝右前叶组织,经处理后以10%甲醛溶液保存,选用自动切片机制备切片,以电镜行病理检验后进行免疫化学染色检验,取模型大鼠血液标本保存。实验对照组以同样时间、方法预胃饲生理盐水后行病理检验与相关生化检验。正常组不给予预处理,分别于0、2、4、8、12 h处死行病理学检查与相关生化检验。所有生化检验局试剂盒上标示操作方法进行操作。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 手术及肝功能指标

所有手术均或成功,实验中未见死亡,建立肛血流再灌注模型时模型正常,未见并发消化道出血,恢复血流供应后肝颜均正常恢复,未见大面积坏死,可进行相关检验。……

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