王 敏 李 柯 魏 蕾 刘永明

上皮细胞钠离子通道（Epithelial Sodium Channel，ENaC）是非电压门控的阿米洛利敏感性离子通道，广泛存在于多个组织器官，如肺、肾脏和大肠的腔面。ENaC能特异性地允许钠离子由细胞外进入细胞内，从而调节体内的水钠代谢［1，2］，并受多种激素、化学物质的调控［3］。

在肺中，ENaC主要存在于Ⅱ型肺泡上皮（Alveolar Type ⅠⅠ Epithelial，ATⅡ）［4］，是影响肺泡液体清除率（Alveolar Fluid Clearance，AFC）的决定因素之一。已知AFC的失衡能够引起多种疾病，如肺水肿、急性肺损伤和成人呼吸窘迫综合症［5，6］。因此，可通过上调肺内ENaC的数量及功能，增加AFC，清除肺内过多的液体，从而治疗肺水肿及其相关疾病。

黄芪注射液（Astragalus Ⅰnjection，AⅠ）含有黄芪多糖、黄芪甲甙、维生素及微量元素（硒、硅、钴）等多种有效成分，能增强机体免疫功能，同时具有利尿、保肝、降压等作用。近年来研究表明，黄芪可以治疗多种水肿［7，8］；多种原因引起的肺水肿，如急性脊髓损伤后肺水肿、脂多糖诱导的肺水肿和油酸诱导的肺水肿等［9］。其作用可能与其减少炎症因子产生［10］、调节钠离子通道［11］和水通道蛋白［12］相关，但具体机尚未明确。本研究通过采用部分通道蛋白抑制剂探讨AⅠ对ATⅡ细胞A549ENaC蛋白表达的影响及其发生机制，为黄芪治疗肺水肿提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验对象

ATⅡ细胞系A549购自武汉大学典藏中心。

1.2 主要试剂和仪器

AⅠ购自成都地奥九泓制药厂，批号0311049，规格10ml／支，相当于原药材20g；细胞计数试剂盒（Cell Counting Kit－8，CCK－8，货号CK04），购自日本同仁化学研究所；MEM培养液（货号SH30021.01），购自南宁基诺生物技术有限公司；兔抗鼠α－ENaC（货号sc－21012）、β－ENaC（货号sc－21013）和γ－ENaC（货号sc－21014）、碱性磷酸酶标记的羊抗兔二抗（货号sc－2057）均购自美国Santa cruz生物科技公司，AG490（货号T3434）购自美国sigma公司；……