邹尚荣，李燕青，周波，简凤璧，陈谐捷（.广州市第八人民医院药剂科，广州 50060；.广州市第八人民医院感染科，广州 50060）

高效抗逆转录病毒治疗（Highly active anti-retroviral therapy，HAART）是目前抗人类免疫缺陷病（HIV）治疗的最有效和最主要的措施。初治HIV感染/艾滋病（AIDS）患者治疗推荐方案为2种核苷类逆转录酶抑制剂（NRTIs）+1种非核苷类转录酶抑制剂（NNRTIs）或2种NRTIs+1种加强型蛋白酶抑制剂（PIs）（含利托那韦）[1]。拉米夫定（Lamivudine，3TC）、齐多夫定（Zidovudine，AZT）、奈韦拉平（Nevirapine，NVP）三者合用是我国目前抗HIV治疗常用的三联用药方案之一，前两者属于NRTIs，而后者属于NNRTIs。为便于临床进行血药浓度监测和开展药动学研究，本试验以甲硝唑（Metronidazole）为内标，建立了同时测定人血浆中3TC、AZT和NVP浓度的高效液相色谱（HPLC）法。

1 材料

1.1 仪器

Agilent 1200高效液相色谱仪，包括G1314B型紫外检测器、Agilent色谱化学工作站（美国Agilent公司）；XW-B型涡旋混合器（江苏康健医疗用品有限公司）；AL204型电子天平（瑞士Mether Toledo公司）；5417R型高速冷冻离心机（德国Eppendorf公司）；B320A型离心机（北京白洋医用离心机有限责任公司）；DZF-6021型真空干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）。

1.2 药品与试剂

3TC对照品（中国药品生物制品检定研究院，批号:101007-200701，纯度＞99.7%）；AZT对照品（中国药品生物制品检定研究院，批号:100672-200401，纯度＞99.5%）；NVP对照品（中国药品生物制品检定研究院，批号:100641-200401，纯度＞99.5%）；内标:甲硝唑（安徽双鹤药业有限责任公司，批号:1209205D）；乙腈、乙酸乙酯为色谱纯，水为双重蒸馏去离子水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18（150mm×4.6mm，5 μm）；流动相:乙腈-水（梯度洗脱程序:0～10min为5∶95，10.1～18.8min为25∶75）；流速:0.8ml/min；柱温:30 ℃；检测波长:268nm；进样量:30 µl。

2.2 对照品贮备液的制备

准确称取3TC、AZT、NVP对照品各适量，分别置于10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，制得质量浓度为1mg/ml的对照品贮备液，贮存于4℃冰箱内避光保存备用。……