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ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中作用研究

2014-05-19杨安宁周龙霞王艳华曹成建陈久凯马文斌姜怡邓

中国药理学通报 2014年3期

杨安宁,王 磊,周龙霞,赵 丽,王艳华,蔡 欣,曹成建,杨 程,陈久凯,马文斌,姜怡邓

(宁夏医科大学1.基础医学院、2.检验学院,宁夏银川 750004)

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是以单核源性巨噬细胞大量吞噬脂质并堆积在血管内膜下形成泡沫细胞为特征的慢性疾病[1]。腺苷三磷酸结合盒转运体 A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)和酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1(acylcoenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT1)在此过程中扮演了重要角色。ABCA1介导细胞内磷脂和游离胆固醇转运至载脂蛋白A-1,促进高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)生成,启动胆固醇逆向转运,在机体清除脂质过程中发挥重要作用[2]。ACAT1是一种催化胆固醇和脂肪酰辅酶A合成胆固醇酯的酶,其可以降低游离胆固醇对细胞的毒性作用[3]。DNA甲基化作为表观遗传学的重要调控方式,在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育、肿瘤形成以及 AS发生中起重要作用[4-5]。循证医学证据表明,同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是AS的重要独立危险因子,在体内,Hcy可能通过甲硫氨酸循环影响基因甲基化水平参与疾病发生[6]。因此,本文从DNA甲基化修饰角度探讨ABCA1和ACAT1在Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中的作用及可能机制,为进一步认识泡沫细胞脂质转运平衡提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要仪器和试剂 倒置相差显微镜(Olympus公司,日本);超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司,中国);电泳仪(Bio-Rad,美国);CO2培养箱(Heraeus,德国);Epoch全波段酶标仪(BioTek,美国);BS110S型精密天平(Sartorius,德国);PCR仪(Bio-Rad,美国);HyClone RPMI 1640培养基(Thermo);胎牛血清(杭州四季青生物工程材料研究所);Hcy(Sigma);总胆固醇(TC)试剂盒和游离胆固醇(FC)试剂盒及油红O染色试剂盒(南京建成生物工程研究所);……

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