郝永龙，陈美荣，黄 铭

（山东中医药大学1.第二附属医院药剂科、2.附属医院眼科，山东 济南 250001）

眼镜蛇神经毒素（α-cobrotoxin，α-CNT）是从中华眼镜蛇毒中（Naja，naja atra）分离出的一种蛋白。该蛋白是由60～70个氨基酸通过4个二硫键连接而成［1］。由于眼镜蛇神经毒素（neurotoxin，NT）特殊的理化性质，使其不易透过血脑屏障（blood-brain barrier，BBB），需要经过一个较长时间的给药过程才能在中枢作用靶位蓄积到较高的药物浓度。在临床中使其应用受到限制。鼻腔给药应用历史悠久［2］，鼻黏膜表面积大，黏膜内有丰富的血管，药物利于吸收，无肝脏首过效应，生物利用度高等优点，鼻腔给药除通过体循环透过BBB进入脑组织外，还可通过嗅神经网络通路及嗅黏膜上皮通路而直接吸收入脑，因而可以避开BBB，使常规用药方法难以进入大脑的药物（如水溶性或大分子药物）易于进入大脑，更好地发挥疗效［3］。微球（microsphere，MS）制剂也因其可明显提高药物的生物利用度，近年来在鼻腔给药系统中得到广泛的研究和应用［4－7］。然而，制备微球最常用，包裹效果最好莫过于PLGA（乳酸／羟基乙酸共聚物）。本文主要应用PLGA包裹眼镜蛇毒神经毒素制备微球，通过鼻腔给药，对其镇痛效果进行研究。

1 材料与仪器

1.1 材料 眼镜蛇毒神经毒素（α-CNT）：由广西医科大学蛇毒研究所提供。相对分子质量约7 000 u（SDS法），等电聚焦电泳测定 PI为 9.5。PLGA（LA／GA 50∶50，［η］＝0.8 dl·g－1）购自德国 Ingelheim公司。海藻酸钠（AGS）：AR，25℃下2%溶液黏度为14 000 cps，购自Sigma化学试剂公司。其他化学试剂皆为分析纯。

1.2 仪器 超声波细胞粉碎机：JY92-Ⅱ，上海新芝生物技术研究所。切式匀浆机（高速分散器）：XHF-1，上海新芝生物技术研究所。……