姚丹静 曲弈 陈金慧

摘要：为探索脯氨酸在杉木胚性愈伤组织超低温冷冻保存过程中的作用，本试验以继代14 d的杉木愈伤组织为材料，在预处理阶段设置不同浓度的脯氨酸，采用TTC法测定相应的细胞存活率。结果表明：预处理阶段，脯氨酸浓度为05 g·L1时，细胞存活率相对最高。说明了在预处理阶段添加适宜浓度的脯氨酸可提高超低温冷冻保存的存活率。

关键词：脯氨酸；超低温冷冻保存；杉木；胚性愈伤组织

中图分类号：S722.3+7文献标识码：A文章编号：1004-3020（2014）03-0030-03

The Influence of Prolin on Cryopreservation of Callus of Cunninghamia lanceolata

Yao DanjingQu YiChen Jinhui

（College of Forest Resources and Environment，Nanjing Forestry UniversityNanjing210037 ）

Abstract： To explore the role of prolin in the process of cryopreservation of embryogenic callus of Cunninghamia lanceolata，the cell survival of 14 days callus of Cunninghamia lanceolata of subculture was measured by the TTC method with different concentrations of proline in the pretreatment stage.The result showed that： in the pretreatment stage， when the concentration of proline was 0.5 g·L1，the cell survival was relatively the highest.It suggested that adding suitable concentration of proline in the pretreatment stage can improve the survival of cryopreservation.

Key words：prolin；cryopreservation；Cunninghamia lanceolata；embryogenic callus

杉木Cunninghamia lanceolata是我国特有的速生商品材树种，被广泛应用于木材和药用方面。目前利用杉木成熟合子胚能成功实现体胚发生 [1 ]，但是经过长时间的继代培养，体胚发生的能力会逐渐降低直至丧失。将超低温冷冻保存技术和杉木胚性愈伤组织培养技术结合起来，能长期保存植物材料并保证其遗传稳定性，可有效解决杉木胚性愈伤组织体胚发生能力衰退的问题 [2 ]。同时，脯氨酸可以提高植物对低温的耐受性 [3，4 ]，其在稳定生物大分子结构、降低细胞酸性、解除氨毒以及作为能量库调节细胞氧化还原势等方面有着重要作用；另外还能作为植物细胞质内渗透调节物质、降低凝固点，防止细胞脱水 [5 ]。本试验在已研究的杉木胚性愈伤组织超低温冷冻保存技术的基础上，探讨在预处理阶段，不同浓度的脯氨酸对杉木胚性愈伤组织超低温冷冻结果的影响。

1材料与方法

本试验采用玻璃化冷冻法 [6 ]，对杉木胚性愈伤组织进行超低温冷冻保存。……