正交试验设计优化超声煎煮法提取丹参中丹参素的研究
2014-04-21杨炳火夏崇才周芙琼胡新
杨炳火 夏崇才 周芙琼 胡新
丹参是唇形科鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎[1],是临床心血管疾病最常用中药之一。具有活血祛瘀,调经止痛,清心除烦的功效[2-3]。丹参素是丹参水溶性成分中的主要活性成分,现代药理研究表明,丹参素具有心肌保护、神经细胞保护、抗氧化、抗炎和增强免疫力、抗肿瘤、改善微循环等作用[4-5]。超声技术提取中药具有提取效率高、省工、省时等优点[6],本文将超声与煎煮相结合对丹参素进行提取,并采用正交实验法筛选最佳提取工艺,同时与煎煮法比较,考察提取效果。
1 材料与方法
1.1 仪器
Agilent 1290 Ⅰnfinity 超高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);Agilent VWD 型检测器(美国安捷伦公司);KQ-300DE 型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);FA1104 电子分析天平(上海良平仪器仪表有限公司);1612-1 离心机(上海医疗器械有限公司)。
1.2 试药
丹参药材(安徽沪春堂中药饮片有限公司);丹参素钠对照品(中国药品生物制品检定所,批号111366-201305);甲醇为色谱纯,水为重蒸水,其它试剂为分析纯。
1.3 丹参药材提取方法
煎煮提取法[7]:取丹参药材约50 g,精密称定,加水500 ml 煎煮,提取3 次,每次40 分钟,合并提取液浓缩至200 ml,作为煎煮法供试品溶液。
超声煎煮提取法:取丹参药材约50 g,精密称定,加入500 ml 水,分别先进行超声处理10、20、30分钟,超声功率300 W,频率40 KHz,然后采用煎煮方式,在煎煮20、40、60 分钟以及煎煮次数1、2、3 次的不同情况下进行提取,所得提取液浓缩至200 ml,离心,过滤,续滤液作为超声煎煮法供试品溶液。
1.4 色谱条件
色谱柱:Kromasil C18 柱(4.6 ×250 mm);流动相:甲醇—0.5%醋酸水溶液=5∶95;流速1 ml/min;检测波长281 nm;柱温30 ℃;进样量10 μl。……
