三甲散对HSC-T6细胞α-SMA、TIMP-1和ROCK-Ⅰ蛋白表达的影响*
2014-04-19郑旭锐闫曙光王礼凤
郑旭锐,惠 毅,闫曙光,宋 逍,曹 宁,王礼凤,晁 旭
(陕西中医学院,咸阳 712046)
三甲散对HSC-T6细胞α-SMA、TIMP-1和ROCK-Ⅰ蛋白表达的影响*
郑旭锐,惠 毅,闫曙光,宋 逍,曹 宁,王礼凤,晁 旭
(陕西中医学院,咸阳 712046)
[目的]检测三甲散含药血清对肝星状细胞株(HSC-T6)细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶抑制-1(TIMP-1)和蛋白激酶(ROCK-Ⅰ)的表达,从而研究三甲散对HSC-T6细胞增殖作用的影响。[方法]以三甲散含药血清干预HSC-T6细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)技术,检测三甲散含药血清对HSC-T6细胞中α-SMA、TIMP-1和ROCK-Ⅰ的蛋白表达。[结果]三甲散和Y-27632显著地降低了HSC-T6细胞α-SMA、ROCK-Ⅰ和TIMP-1 mRNA和蛋白的表达。[结论]三甲散可降低HSC-T6细胞ROCK-Ⅰ蛋白、TIMP-1和α-SMA的表达,从而抑制HSC-T6细胞的增殖。
三甲散;α-SMA;TIMP-1;ROCK-Ⅰ;蛋白表达
肝纤维化是指肝细胞发生炎症刺激或坏死时,各种致病因子致肝脏中细胞外基质(ECM)增生和降解之间失去应有的平衡,进而导致肝脏内纤维结缔组织异常沉积、肝内弥漫性细胞外基质过度沉淀的病理过程,其进一步发展即可以导致肝硬化、肝癌。据资料统计,中国约有3 000万慢性肝炎患者,其中约有20%~40%可发展为肝硬化乃至肝细胞癌[1]。肝星状细胞(HSC)是肝脏细胞外基质的主要细胞来源,是肝纤维化形成的细胞学基础。细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)可作为HSC活化的标志。基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)是组织型基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)家族中作用最强的成员,为促纤维化因子[2]。Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK-Ⅰ)是由属于小G蛋白超家族的Rho小G蛋白激活的,它可以调节肝星状细胞的多种生物学行为,包括表型、运动、生长分裂、凋亡、基因表达等,从而激活肝纤维化发生的中心环节。……
