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一种快速提取血吸虫虫卵方法的建立

2014-04-17赵登云林矫矫童来保赵家喜朱传刚

中国动物传染病学报 2014年6期
关键词:血清检测

赵登云,许 瑞,林矫矫,2,陆 珂,洪 炀,李 浩,童来保,赵家喜,朱传刚

(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241;2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009;3.安徽省望江县畜牧兽医局,望江 246000)

一种快速提取血吸虫虫卵方法的建立

赵登云1,许 瑞1,林矫矫1,2,陆 珂1,洪 炀1,李 浩1,童来保3,赵家喜3,朱传刚1

(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200241;2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009;3.安徽省望江县畜牧兽医局,望江 246000)

为探索一种快速提取血吸虫虫卵并保持虫卵抗原性的方法,本研究用血吸虫尾蚴感染兔并收集其肝脏,分别用不同浓度的NaOH、不同温度和时间消蚀含有虫卵的肝脏匀浆液,以确定最佳提取虫卵条件。通过方阵法确定所提取虫卵的可溶性抗原最佳包被浓度,并对虫卵抗原灵敏度进行了检测。另外,通过测定75份阳性血吸虫水牛血清和60份阴性水牛血清,进一步检测了此法提取并制备抗原的灵敏性。结果表明,本研究所建立的方法在不同NaOH浓度、作用温度和作用时间下,对提取的虫卵均产生影响。NaOH浓度越高,作用时间越久,消蚀温度越高,对虫卵的破坏越显著,表现在虫卵内容物的凝聚和消融,虫卵的空壳化增多。3种不同浓度NaOH 提取虫卵的抗原检测下限分别为1/800、1/1600、1/3200,较过筛法的抗原检测下限1/400有显著提高。对水牛的血清检测结果表明,用NaOH消蚀法提取的虫卵抗原检测血吸虫灵敏性是93%,比常规过筛法高5%,特异性是100%,比常规过筛法高3%。……

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