李海

HBsAg和HBeAg定量检测的临床应用及意义

李海

HBsAg和HBeAg定量检测越来越广泛的应用于临床。最近研究表明，这种定量检测不仅仅是一种方法学的进步，还能够指导慢性乙型肝炎患者预后及治疗，且一些基础和临床研究表明，这些抗原检测具有重要的临床意义，本文综述近年来此方面的重要进展并初步提出以后的研究方向。

乙型肝炎病毒表面抗原；乙型肝炎病毒e抗原；慢性乙型肝炎；定量检测

在乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）的感染自然史过程中，乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B virus surface antigen，HBsAg）及e抗原（hepatitis B virus e antigen，HBeAg）在不同阶段有不同的表现，这些抗原的出现与消失均影响患者的临床治疗和预后，因此，目前我国的慢性乙型肝炎防治指南将慢性乙型肝炎分为HBeAg阳性和HBeAg阴性的慢性乙型肝炎［1］。而基础研究提示，无论是HBsAg还是HBeAg均与慢性乙型肝炎的发病机理相关，因此其在乙型肝炎的诊断及治疗中均有较重要作用。近年来，HBsAg和HBeAg定量检测已经较广泛的应用于临床，和定性检测相比，这些定量检测结果表明，HBV的两种抗原的变化与机体的免疫状态、患者预后及疗效评价均有密切关系。

1 HBsAg定量检测的临床意义

目前，临床应用的HBsAg的定量检测多采用化学发光微粒子免疫技术（雅培公司Architect或Axym，罗氏公司的RHBsAg II定量检测），其检测范围为0．05～250 IU／mL，经过标准稀释或者自动稀释可以达到125 000 IU／mL。

基础研究［2，3］表明，HBsAg数量与HBV的聚合环状共价DNA（cccDNA）相关，其动态变化可在一定程度上说明病毒在体内的活跃程度，而且其与肝脏纤维化程度相关。更多的临床研究还是聚焦于此项检测对HBV感染患者治疗的疗效评价及自然史变化。

早期的一项队列研究［4］评价了48例接受聚乙二醇干扰素治疗的HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者（治疗48 w，停药后再观察48 w）的HBsAg定量检测结果。如果治疗后患者HBV DNA转阴，停药后仍然有反弹情况，而且DNA水平降低程度无法区分反弹组和持续应答组，则HBsAg水平下降可作为预测患者发生持续病毒应答的指标。治疗12 w时，HBsAg下降0．5 log IU／mL的阳性预测值为89%、阴性预测值为90%，治疗24w时HBsAg下降1 log IU／mL的阳性预测值为92%、阴性预测值为97%；而且通过对3例HBsAg阴转患者的分析发现，HBsAg的下降和HBV DNA阴转的关系并不密切。

来自台湾学者的一项自然史研究［5］纳入了2491例HBeAg阴性的非肝硬化的慢性HBV感染者，对其HBsAg的转阴影响因素进行前瞻性研究观察，发现基线时的HBsAg定量水平可预测此类患者HBsAg的阴转。如果基线时HBsAg定量水平小于100 IU／mL，则出现HBsAg阴转的相对危险度值为10．96，如果联合HBV DNA阴性的话，则预测患者5年和10年HBsAg清除率的准确度分别为89%和84%。这项研究说明了HBsAg定量对于没有进行抗病毒治疗患者的预后判断具有一定作用。

对于治疗期患者，一项研究［6］纳入了59例HBV合并HIV感染患者，其中36例HBeAg阳性，23例HBeAg阴性。研究观察抗病毒治疗后哪些因素影响HBsAg转阴，最终只有HBsAg定量是强烈预测HBsAg阴转的因素。这项研究表明，对于抗HBV治疗患者，HBsAg定量是预测HBsAg血清学转换的重要指标。还有一项研究［7］对20例应用替诺福韦治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者进行观察，同样发现HBsAg定量是HBeAg血清转换的重要预测指标。

过去认为HBsAg与慢性乙型肝炎的病情并无明显相关，最近一项研究［3］表明，如果用氨基比林呼气试验联合HBsAg定量检测，与肝脏纤维化程度呈正相关，该研究主要避免了不同患者残余肝细胞不同的误差，经过计算，其判断肝纤维化准确度高达90%以上。而基础实验［8］也表明，HBV确实能激活肝脏巨噬细胞，影响纤维化细胞，并产生相关的促纤维化细胞因子。此外，还有一些学者［9］认为，与HBVDNA水平相比，HBsAg定量检测能更好地反映肝内cccDNA水平，而后者的清除主要是通过细胞免疫来实现的。

目前的研究表明，HBsAg的定量检测在判断患者治疗预后及自然史预后方面均有优势，并且与患者疾病进展程度相关，能更好代替肝脏细胞内HBV复制水平。因此，HBsAg定量检测不仅是一个治疗效果的监测指标，也是对于未治疗的HBV感染患者预后判断的良好指标。

2 HBeAg定量检测的临床意义

HBeAg在慢性乙型肝炎发病中有重要作用，其与免疫系统的相互作用使得HBV更容易在肝脏存活并复制。最近一项基础研究［10］表明，HBeAg可干扰体内树突状细胞的功能，此外HBeAg还有可能干扰T细胞功能［11-13］。在慢性乙型肝炎患者的自然史中，HBeAg消失是最重要的一项变化，因为随着HBeAg的减少，病毒在被免疫系统清除的同时会引起肝脏炎症发生［14］。我国的慢性乙型肝炎指南也将慢性乙型肝炎患者按照HBeAg阴性与否进行分类，因此，与HBsAg一样，HBeAg也是HBV感染中重要的病毒标志物［15］。

目前，HBeAg定量检测并没有完全统一的国际单位，文献中采用最多的检测方法主要为微粒子酶免疫分析技术，使用的单位为PEIU／mL（Paul Ehrlich Institute Unit），这种方法检测范围为0.15～200 PEIU／mL，也可以进行稀释检测［16］。罗氏检测方法可以通过公式换算而获得PEIU／mL的定量指标。两种方法检测结果基本一致［17］。

对HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者的观察研究［18］发现，HBeAg定量能较准确的预测自发性HBeAg血清转换。还有一项研究［19］表明，如果采用恩替卡韦治疗患者HBeAg小于100PEIU／mL，且HBVDNA小于1000 IU／mL，若换用长效干扰素治疗，则在治疗48w后HBsAg转阴率增加至8.5%，而HBeAg血清学转换率也会达14.9%，而没有换药患者仅有6.7%HBeAg血清转换率和0.0%的HBsAg血清转阴率。

早期一项研究［20］表明，HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者，其HBeAg定量低于31 PEIU／mL者，在采用聚乙二醇干扰素治疗后有54%达到HBeAg血清学转换，而HBeAg定量大于1294 PEIU／mL者，在治疗后有24%达到HBeAg血清学转换，提示基线HBeAg定量可预测治疗效果；如12 w时HBeAg定量小于10 PEIU／mL，有53%的患者达到HBeAg血清学转换，而此时大于100 PEIU／mL仅有10%的HBeAg血清转换应答；较低的HBeAg定量患者阳性预测值为51%，较高的HBeAg定量患者阴性预测值为96%。在预测HBeAg转换疗效时，HBeAg定量的准确性高于HBVDNA，因此在治疗前、治疗中进行HBeAg定量检测，可预测疗效并优化治疗方案，即所谓干扰素应用中的“应答指导的治疗”。但是这种预测作用会受到病毒前C区变异的影响，因此有必要检测病毒变异，在除外病毒变异的情况下，HBeAg定量会更好地评估患者的预后［21］。

总之，随着HBsAg和HBeAg定量检测技术的广泛应用，我们对这两种抗原的基础及临床作用认识更加清楚一些，但还有一些问题需要进一步研究，比如两种抗原之间的相互作用及病毒抗原如何导致疾病进展等将通过进一步基础及临床研究来回答。

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10.3969／j.issn.1674－7151.2014.04.014

2014-10-17）

（本文编辑：陈淑莲）

300162 天津市，武警后勤学院附属医院消化二科／肝胆胰脾中心