张 红，生秀梅，徐顺高，黄新祥，许化溪

（江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江212013）

伤寒沙门菌（Salmonella enterica serovar Typhi简称S.Typhi）是一种具有鞭毛的革兰阴性人类肠道致病菌，经消化道感染后可以引起全身系统性疾病——伤寒热［1］.mig－14是S.enterica从S.bongori谱系中分离出来时通过水平转移从大肠埃希菌（Escherichia coli，简称E.coli）中获得，随后II（Salamac）型和IV（Houtenae）型S.enterica丢失该基因，故而，mig－14只存在于I型、Ⅲa型和IIIb型沙门菌的染色体上，是引起伤寒热的致命性感染因素［2］.mig－14是一种独立的致病因子，它的表达受到宿主细胞内环境的影响，在沙门菌感染早期不发挥新陈代谢作用或管家基因的作用［3］，Valdivia等人发现mig－14对沙门菌在宿主细胞内生存有作用［2］.mig－14具有拮抗PB的功能，其作用机制尚不明确.序列分析显示，mig－14与转录调节蛋白AraC家族有一定的同源性［4］，提示它可能是一种调节蛋白.

为了探寻Mig－14拮抗PB的分子机制，本实验室尝试将mig－14基因克隆至表达载体p ET22b（＋），并转入大肠埃希菌JM109中进行表达，但始终得不到表达产物.经密码子偏好性分析发现mig－14基因中含有大量稀有密码子（8%）.密码子偏爱性在原核基因异源表达中是一个很重要的影响因素.一般情况下，异源基因包含的密码子在特定宿主中的利用率越低，该种蛋白的表达量也就越少，而通常采用的解决策略是优化目标基因中的稀有密码子，在不改变氨基酸序列的前提下，将低利用率的密码子替换为宿主常用密码子来提高目标蛋白的表达水平.

本研究首次采用密码子优化策略对mig－14基因在大肠杆菌中进……