甲基绿探针吸收光谱法测定安乃近

2014-03-26谭建红

实验技术与管理 2014年8期

谭建红，黄惟，江虹

(长江师范学院化学化工学院，重庆 408100)

安乃近(ANG)是一种重要的解热镇痛类药物，由氨基比林和亚硫酸钠结合得到，在临床上广泛用于感冒、头痛、发热、肌肉关节痛、牙痛、痛经、风湿及类风湿关节痛等的治疗，其解热镇痛效果快而强，使用方便，价格低廉，优于其他解热镇痛药。目前，测定安乃近的方法主要有滴定法[1]、高效液相色谱法[2-5]、电化学分析法[6-8]、紫外分光光度法[9-10]、红外光谱法[11]、荧光分析法[12]、化学发光法[13-15]等。这些方法使用仪器或较贵不易普及或操作麻烦费时、灵敏度较低等，不适用急检需要。本实验在碱性条件下，以甲基绿(MEG)作探针，建立了检测安乃近的吸收光谱法，迄今未见文献报道。实验发现，安乃近与甲基绿反应后的生成物能使溶液颜色产生褪色现象，在可见光区出现3个明显的褪色峰，最大和次大褪色波长分别位于670 nm和424 nm，表观摩尔吸光系数分别为1.82×104L/(mol·cm)和1.50×104L/(mol·cm)，在此两波长处，安乃近在一定浓度范围内与吸光度的绝对值呈良好的线性关系，服从比尔定律，能用于安乃近的定量分析。该法用于实际样品测定，结果满意。

1 实验

1.1 仪器与试剂

仪器：U-3010型紫外-可见分光光度计(日本，日立公司)；S20K型pH计。

试剂：安乃近(重庆药检所提供)标准溶液(1.0×10-4mol/L)，冰箱中4 ℃保存。甲基绿(MEG，中国医药(集团)上海化学试剂公司)溶液(1.0×10-3mol/L)。三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲溶液为0.1 mol/L盐酸溶液和0.2 mol/L Tris混合而成，用酸度计测定配成pH 3.0～9.8的系列缓冲溶液。试剂均为分析纯，实验用水为超纯水。

1.2 实验方法

于10 mL具塞比色管中，依次加入适量的1.0×10-4mol/L安乃近标准溶液，2.0 mL、pH为9.60的Tris-HCl 缓冲溶液和 3.0 mL、1.0×10-3mol/L的甲基绿溶液，用水稀释至刻度，摇匀后室温下放置20 min，以试剂空白作参比，用1 cm 比色皿在670 nm和424 nm波长处测定溶液的吸光度A。

2 结果与讨论

2.1 吸收光谱

测得的溶液的吸光度曲线见图1。

图1 安乃近溶液吸收光谱

从图1可见，安乃近在可见光区几乎无吸收，甲基绿在可见光区产生较强吸收，其最大吸收波长λmax= 630 nm，A=0.668；在碱性条件下，安乃近与甲基绿反应生成具有3个负吸收峰的络合物，其负吸收波长分别位于 424 nm、542 nm和670 nm，从曲线3—7可以看出，最大负吸收波长为670 nm(红移40 nm)和次大负吸收波长为424 nm(紫移206 nm) 处，安乃近在一定浓度范围内，其吸光度的绝对值与浓度呈正比关系，服从比尔定律；而在542 nm处，安乃近与吸光度之间无线性关系。由此可知，在670 nm 和424 nm 处可用于安乃近的定量分析。

2.2 溶液酸度

室温下，考察了BR、Tris-HCl缓冲溶液对体系络合反应的影响。结果表明：在pH为7.2～9.8的Tris-HCl 条件下，体系有较大的灵敏度，实验用pH为9.60 的Tris-HCl 缓冲溶液，用量以2.0 mL 为宜。

2.3 染料用量

室温下，考察了不同用量的1.0×10-3mol/L MEG 溶液对体系灵敏度的影响.结果表明,MEG的适宜用量是2.7～3.2 mL，实验用 3.0 mL、1.0×10-3mol/L的MEG 溶液。

2.4 试剂加入顺序

室温下，考察了ANG、MEG及pH为9.60 的Tris-HCl 溶液在不同加入顺序时对体系吸光强度的影响。结果表明：按ANG、Tris-HCl、MEG的加入顺序配制溶液，生成的络合物在424 nm和670 nm处其吸光度的绝对值较大，实验选用该加入顺序。

2.5 反应时间

考察了在670 nm处不同时间对体系灵敏度的影响，结果表明：20 min后吸光度值趋于平稳，稳定时间可达1 h以上，实验选在室温下20 min后测定。

2.6 干扰实验

室温下，670 nm 处，考察了药物制剂中常见辅料物质对测定安乃近含量的干扰情况。结果表明，100倍的葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、NaCl、KCl及60倍的L-色氨酸、L-亮氨酸、L-组氨酸、甘氨酸、谷氨酸，20倍的淀粉、利福平、麦迪霉素、红霉素、罗红霉素等对安乃近的测定均无干扰。

2.7 标准曲线

按实验方法配制系列标准溶液(浓度为c)并扫描吸收光谱，作A-c标准曲线。得到的一元线性回归方程、相关系数、线性范围及灵敏度等见表1。

表1 标准曲线相关参数

2.8 样品测定

取安乃近片3粒，用水溶解后过滤，转入1 000 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取安乃近注射液和安乃近滴鼻液各1支，分别将其内容物置于500 mL 容量瓶中，用水稀至刻度，摇匀。取前述稀释液各1.0 mL，分别置于100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，安乃近片待测液记为1#、安乃近注射待测液记为2#、安乃近滴鼻待测液记为3#。取各待测液1.0 mL，分别在670 nm波长下，按实验方法各平行测定6次，同时作加标回收实验，结果见表2。