杨非柯 刘竟芳 陈伟 何新平 卢桂静

.基础研究.

外源性硫化氢对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖转运体4表达的影响

杨非柯 刘竟芳 陈伟 何新平 卢桂静

目的 观察外源性硫化氢(H2S)对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的影响，并探讨其机制。方法 用高糖高胰岛素培养3T3-L1脂肪细胞，建立IR细胞模型，外源性H2S供体NaHS (10-5、10-4和10-3mol/L)处理IR 3T3-L1细胞12、24和48 h。MTT法检测细胞活力，葡萄糖氧化酶法检测培养液中的葡萄糖消耗量，2-脱氧-［3H］-D-葡萄糖摄入法检测葡萄糖的摄取。实时定量PCR和Western blot检测葡萄糖转运体4(Glut4)的表达。结果 与对照组比较，IR模型组细胞葡萄糖消耗和摄取量以及Glut4 mRNA和蛋白的表达显著降低(均为P＜0.05)。与对照组比较，所有浓度的NaHS均未影响细胞活力。与IR模型组比较，NaHS(10-4和10-3mol/L)处理24和48 h显著增加细胞葡萄糖消耗和摄取量以及Glut4 mRNA和蛋白的表达(均P＜0.05)。结论 外源性H2S改善了高糖高胰岛素诱导的脂肪细胞的IR，其机制可能与H2S上调Glut4的表达有关。

硫化氢； 胰岛素抵抗； 高糖； 高胰岛素； 葡萄糖转运体4型

硫化氢(hydrogen sulfide，H2S)被称为第三种气体信号分子，广泛分布于心血管、内脏和神经系统等［1-2］。研究显示，H2S在胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)发生和发展过程中发挥重要作用［3］。本研究应用硫氢化钠(sodium hydrosulfide，NaHS)作为H2S供体，观察外源性H2S对3T3-L1脂肪细胞IR的影响，并探讨其机制。

1 材料和方法

1.1 材料

3T3-L1前脂肪细胞购自中国医学科学院基础医学研究所细胞库。3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine，IBMX)、地塞米松、NaHS、重组人胰岛素和四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)购自Sigma公司。高糖和低糖DMEM培养基、胎牛血清、RNA酶抑制剂、逆转录酶(M-MuLV)试剂盒、Trizol、Hot Star Taq Master Mix试剂盒购自Invitrogen公司。……