苦参碱对HaCaT细胞Bcl-2/Bax和Fas/FasL的调控
2014-03-22牟宽厚艳韩
牟宽厚 周 艳韩 丹 穆 欣
·论著·
苦参碱对HaCaT细胞Bcl-2/Bax和Fas/FasL的调控
牟宽厚 周 艳∗韩 丹 穆 欣
目的: 明确苦参碱对HaCaT细胞Bcl-2/Bax和Fas/FasL表达的影响。方法: 体外培养HaCaT细胞,选择第二代细胞对数生长期HaCaT细胞作为研究对象,将细胞随机分为4组:苦参碱2 mg/mL、10 mg/mL和50 mg/mL 3组及对照组(加入相同体积的0.9%盐水),孵育48 h后,MTT法测定各浓度下细胞增殖,RT-PCR检测Bcl-2/Bax和Fas/FasL的表达。结果: 与对照组相比,当苦参碱浓度为2 mg/m L时,HaCaT细胞增殖活性无明显变化;Bcl-2、Bax、Fas、FasL表达也无明显变化(P>0.05)。当苦参碱浓度为10mg/mL时HaCaT细胞增殖活性较对照组明显下降(P<0.001);Bcl-2表达明显下降,Bax表达上升(P<0.001);Fas、FasL表达上升(P<0.05)。当苦参碱浓度为50mg/mL时,MTT法检测HaCaT细胞增殖明显抑制(P<0.001);同时Bcl-2、Bax、Fas和FasL的变化与10mg/mL时相似(P>0.05)。结论: 苦参碱能够调控上皮细胞致炎因子的表达,抑制细胞的增殖。
苦参碱; HaCaT细胞; 实时定量PCR; Bcl-2/Bax; Fas/FasL
正常皮肤角质形成细胞增殖和凋亡速度是相同的,但在银屑病中存在多种细胞凋亡相关基因的表达异常,最终造成银屑病角质形成细胞增殖和凋亡的平衡失常,其中以Bcl-2/Bax及Fas/FasL较为重要。维A酸类药物对银屑病有效但无法控制银屑病的复发,在以往的研究中,我们试将维A酸类药物与苦参素(苦参碱)合并应用,取得良好效果,1且患者可以维持较长的缓解期,为了进一步证实苦参碱的有效性,我们正在尝试在临床上单用苦参碱来治疗寻常型银屑病,小样本的实验已经取得了满意的疗效,本实验对其作用机制进行进一步研究。
1 材料和方法
1.1 主要试剂和器材 人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)(第四军医大学皮肤实验室馈赠),并由本实验室保存;……
