秦黎 尹菁

1 江苏省医疗器械检验所 （南京 210033）

2 江苏省食品药品检验所 （南京 210008）

0.引言

乙二胺四乙酸(EDTA)盐作为一次性使用真空采血管中的抗凝剂在临床上应用广泛。由于EDTA 对血细胞形态影响很小，因此适用于血细胞计数，特别是血小板计数。常用的EDTA 有二钠、二钾和三钾盐。乙二胺四乙酸二钠盐与氟化钠混合添加的采血管还可用于血糖检测。抗凝需要足够量的EDTA，但过量的EDTA 会改变血细胞形态学，因而有必要控制真空采血管中EDTA 盐的含量。[1]

目前常用的EDTA 检测方法有渗透压法[2]和滴定法，这两种方法的专属性较差，不能区分EDTA 与其他金属络合剂，尤其在有氟化钠存在时可能对检测有影响；灵敏度较低，对于公称容量较小，EDTA 含量较低的样品，在测定中可能存在较大误差。通过比较参考文献中的几种色谱条件[3][4][5]，本文建立了一种专属性强，灵敏度高，且准确方便的高效液相色谱测定方法。

1.仪器与试药

岛津20AB 高效液相色谱仪（日本）；BT125D电子天平（德国Sartorius）；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯乙二胺四乙酸二钠二水合物（国药集团化学试剂有限公司，纯度≥99.0%，批号：T20090303）

一次性使用真空采血管均由苏州鱼跃医疗科技有限公司提供，样品1（含EDTA-Na2,批号：130402，公称容量为2ml，每毫升血液中含EDTA1.4mg～2.0mg），样品2（含EDTA-Na2/氟化钠,批号：130403，公称容量为2ml，每毫升血液中含EDTA1.2mg～2.0mg；氟化钠2mg～4mg）

2.色谱条件

色谱柱：Venusil MP C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇-25%四丁基氢氧化铵-88%甲酸-水(20:1.3:0.6:980)（pH3.5）；检测波长：254nm；柱温：30˚C; 流速: 0.6 mL/min; 进样量：20 μl。

供试品溶液：取一次性使用真空采血管一支，用少量水洗涤数次，将内含的添加剂定量转移至20ml 量瓶，用水定容，摇匀，精密量取5ml至50ml 量瓶，精密加0.1mol/L 的三氯化铁溶液1ml，用水定容，摇匀（乙二胺四乙酸二钠浓度约为20μg/ml）。……