符爽，孙开来，富伟能

（中国医科大学1.基础医学院遗传学教研室，沈阳110001；2.附属盛京医院血液研究室，沈阳110022）

MYCT1新转录本的克隆与表达分析

符爽1，2，孙开来1，富伟能1

（中国医科大学1.基础医学院遗传学教研室，沈阳110001；2.附属盛京医院血液研究室，沈阳110022）

目的确定MYCT1基因的转录起始点并克隆该基因新的转录本，探讨该基因的结构和功能。方法利用已知MYCT1的保守序列，应用5′-RACE技术确定转录起始点位置，结合3′-RACE拼接得到新转录本的精确全长；然后利用生物信息学软件对新转录本与MYCT1的cDNA序列及氨基酸序列进行对比分析；最后利用RT-PCR的方法分析新转录本的细胞表达谱。结果成功克隆得到长1 106 bp的新转录本MYCT1-TV，其转录起始点位于ATG上游140 bp处。MYCT1-TV与MYCT1在结构上无明显差异，并广泛表达于各个细胞系。结论MYCT1转录起始点的确定和新转录本MYCT1-TV的克隆，为进一步研究MYCT1基因的转录调控机制及基因功能奠定了实验基础。

MYCT1；MYCT1-TV；喉癌；RACE

MYCT1（Myc target 1）是本研究室前期应用实体瘤培养、常规G显带、FISH及电子杂交的方法从喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma，LSCC，以下简称喉癌）中克隆得到的新基因，曾命名MTLC（c-Myc target from laryngeal cancer cells），Gen-Bank登录号为AF_527367［1］。

MYCT1基因定位于染色体6q25，全长约21 kb，含2个外显子，其mRNA序列长约1 006 bp，编码含235个氨基酸的蛋白质。本研究组在前期研究中通过生物信息学方法，预测该基因转录起始点位于ATG上游47 bp处［1］，但未经实验证实。进一步研究MYCT1基因的结构并确定其转录起始点，对了解该基因的功能和阐明其转录调控机制具有重要意义。本研究利用已知MYCT1的保守序列，以正常人外周血……