丁 琼 任达兵 秦燕华 梁逸曾

(中南大学化学化工学院中药现代化研究中心，湖南 长沙 410083)

引言

湖北海棠(Malus hupehensis)，又称茶海棠、野海棠，广泛地作为一种观赏树种，其嫩叶可作茶，果能消食并供酿酒[1]。湖北海棠广泛生长于湖北西部山地，长江中游，湖南，云南中、南部。湖北海棠含有茶多酚、黄酮、Zn、Cr、Mn等多种矿物质等,具有抗菌消炎、耐缺氧、抗疲劳、降血糖等多种药理作用[2]。

高速逆流色谱(high-speed countercurrent chromatography，简称HSCCC)是由美国的Ito博士在液-液分配色谱的基础上发展起来的新型制备分离色谱技术[3]。相对于其他色谱技术，HSCCC具有不需要固定相支撑体、溶剂可回收、样品前处理要求低等优点[4]。尤其是其无不可逆吸附的特点在天然物质的分离提取中有无可比拟的优势。虽然高速逆流色谱的引进时间比较晚，但是它已经广泛用于天然产物的分离分析[5]。本文采用离线二维高速逆流色谱法[6]分离提取湖北海棠叶中的主要黄酮成分，获得三个高纯度黄酮化合物，为该中药的提取工艺提供了一个新的选择。

1 实验部分

1.1 仪器、试剂与材料

TBE-300B半制备型高速逆流色谱仪(上海同田生物技术有限公司)，包括恒流泵，紫外检测仪(254nm,280nm)，N2010色谱工作站，采用多层聚四氟乙烯螺旋管(直径1.6nm，总容积280mL)，20mL进样圈，HX-1050恒温循环器(北京博医康实验仪器有限公司)，BSZ-100自动馏分收集器(上海青浦沪西仪器厂)。Ultimate 3000高效液相色谱(HPLC)仪(美国Dionex公司)，包括HPG-3x00RS二元梯度泵，WPS-3000RS自动进样器，MWD-3000RS DAD检测器，TCC-3000 RS柱温箱，CHROMELEON色谱工作站，在线脱气机。R-1002型旋转蒸发仪(郑州长城科工贸有限公司)；……