吴新世，董晓惠，李 羚

（天津理工大学化学化工学院，天津300384）

筛选高产乙醇的酿酒酵母对于人类开发新能源具有重要意义.高产酿酒酵母可通过自然突变、菌种诱变或遗传改造等多种方式获得.菌种诱变是目前相对成熟的技术手段，它不需要十分了解菌株的遗传背景，且定向性好，突变得率较高.自从应用微生物领域开展菌种诱变以来，目的突变株的诱变和筛选一直是育种工作者重点攻克的方向之一.关于菌种诱变特别是酵母菌的诱变选育，已有大量研究报道[1-11]，多种诱变筛选方法构成了微生物诱变育种的方法体系.目前，酵母菌突变株的诱变方法中，大多为单因素或双因素不连续诱变，诱变效果也不相同.虽然也有双因素连续诱变的报道[2]，但过程相对简单，未形成完整的连续诱变方法体系.在诱变后的筛选过程中，为便于目的突变株的检出，常规筛选中需要人为地使菌株携带上某种筛选标记，但这种处理可能会对目的性状产生负面影响[12].因此，在不损伤亲株遗传背景的前提下检出目的菌株，对于突变株优良性状的获得以及防止菌株性能衰退等都具有重要意义.

本课题组利用己烯雌酚（diethylstilbestrol，DES）和UV对工业用酿酒酵母进行连续诱变，之后采用改进的发酵小管集气法筛选目的突变株.该连续诱变方法相对完整，筛选方法快速而且对亲株遗传背景没有损伤.

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

出发菌株为高产乙醇的工业用酿酒酵母QD（Saccharomyces cerevisiae），由本实验室保存.