痰瘀同治对大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响*
2014-02-06薛金贵王玉琦高俊杰兰德辉沈智杰戎靖枫陈铁军王肖龙
薛金贵 王玉琦 郭 炜 高俊杰 兰德辉 沈智杰 戎靖枫 陈铁军 王肖龙 周 华
(上海中医药大学附属曙光医院,上海 201203)
动脉粥样硬化(AS)斑块的产生和发展是造成血管狭窄的主要因素,而斑块的不稳定甚至破裂是引起急性冠脉综合征(包括不稳定型心绞痛和心肌梗死)的罪魁祸首。已有研究提示AS斑块的形成与炎细胞浸润、内皮细胞破坏,血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、迁移等有关。中医药对延缓或逆转AS斑块进展的研究尚不多。近年来研究发现,痰瘀互结是许多冠心病患者的主要病机,痰瘀同治可明显缓解心绞痛。丹蒌片是痰瘀同治的代表方剂,在治疗冠心病、稳定AS斑块等方面有较为显著的疗效,但机制尚不清楚。本实验通过体外培养血管平滑肌原代细胞,血小板衍生因子BB型(PDGF-BB)诱导其增殖,通过MTT法观察中成药丹蒌片药物血清作用下,VSMC增殖的情况,并阐述其可能机制。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物 雄性 SD 大鼠,体质量(180±20) g,6~8 周龄,购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,动物合格证号 SCXK(沪)2008-0016。
1.2 仪器与试药 细胞培养箱(德国Heraeus公司,型号HERAcell150);倒置生物显微镜(重庆光电);超净台(苏州安泰空气净化有限公司,型号BHC-1300IIA/B3);流式细胞仪(BD FACSCalibur E97501326);酶标仪(美国伯腾仪器有限公司);荧光显微镜(Olympus美国);离心机(eppendorf美国)。 DMEM(低糖)培养基、PBS、FBS、0.25%胰酶(corning cellgro USA,均购自上海普飞生物技术有限公司);青霉素、链霉素、二甲基亚砜、细胞固定液、细胞封片液、一抗稀释液、二抗稀释液、抗小鼠-FITC免疫荧光试剂盒、α-actin SM specific一抗、RNASE、PI、MTT粉末 (均购自上海碧云天生物技术有限公司)。……
